当前位置：首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > Phosphoproteins > HTRF HER3 TOTAL KIT - 500 PTS

HTRF HER3 TOTAL KIT - 500 PTS

分享给好友

rvty_ls_sds_64NR3PEG_UK rvty_ls_sds_64NR3PEG_US rvty_ls_sds_64NR3PEG_SPA rvty_ls_sds_64NR3PEG_ITA rvty_ls_sds_64NR3PEG_ELL rvty_ls_sds_64NR3PEG_DEU rvty_ls_sds_64NR3PEG_FRA rvty_ls_manual_64NR3PEG-64NR3PEH

收藏咨询

品牌： Revvity

产品详情
相关解决方案
相关资源
相关视频
相关问答

概述

总 HER3（人表皮生长因子受体 3）细胞检测可监测 HER3 的水平，且可用作磷酸化 HER3 检测试剂盒的归一化检测工具。HER3（即人表皮样受体 3/ErbB3）的过表达被视为人类乳腺癌预后不良的指标之一。HER3 与 HER2 形成异源二聚体，会导致乳腺癌侵袭性增强。研究还发现，HER3 与前列腺癌、胃癌、结直肠癌及其他癌症的发生发展相关，这使得 HER3 成为抗癌治疗的关键靶点。

工作原理

总 HER3 检测原理

总 HER3 检测可对细胞裂解液中 HER3 的表达水平进行定量分析。与蛋白质印迹法不同，该检测完全基于微孔板开展，无需凝胶、电泳或转膜步骤。总 HER3 检测采用两种标记抗体：一种与供体荧光团偶联，另一种与受体荧光团偶联。两种抗体均对 HER3 蛋白上的特定表位具有高度特异性。当细胞提取物中存在 HER3 时，加入这些抗体偶联物会使供体荧光团与受体荧光团近距离接触，进而产生荧光共振能量转移（FRET）信号。该信号强度与样品中 HER3 蛋白的浓度呈直接正相关，且可通过 “免洗涤” 检测模式评估该蛋白的表达水平。

（标注：total-her3-cellular-assay-principle）

总 HER3 双板检测方案

双板检测方案的流程为：先在 96 孔板中培养细胞，随后进行裂解；将裂解液转移至 384 孔低体积检测板后，再加入总 HER3 均相时间分辨荧光（HTRF）检测试剂。该方案可实现对细胞活力和汇合度的监测。

（标注：total-her3-2-plate-assay-protocol）

总 HER3 单板检测方案

使用 HTRF 试剂检测总 HER3 时，可在同一块微孔板中完成细胞培养、刺激和裂解操作，无需洗涤步骤。该方案专为高通量筛选设计，既能实现实验微型化，又能保持稳定可靠的 HTRF 检测质量。

（标注：total-her3-1-plate-assay-protocol）

检测验证

酪氨酸激酶抑制剂与单克隆抗体对磷酸化 HER3 的抑制作用

先培养 100,000 个细胞，随后用不同浓度的抑制剂进行预处理。在 37°C、5% 二氧化碳条件下，对细胞进行或不进行 100 纳摩尔每升调蛋白 Beta1（HRG Beta1）刺激。完成上述步骤后，移除培养基，加入 50 微升裂解缓冲液，在室温下轻轻振荡裂解细胞 30 分钟。检测时，取 16 微升裂解液转移至 384 孔小体积白色微孔板中：加入 4 微升 HTRF 磷酸化 HER3 检测试剂以检测磷酸化 HER3，加入 4 微升 HTRF 总 HER3 检测试剂以检测总 HER3 蛋白。孵育过夜后记录 HTRF 信号。

（标注：phospho-assay-validation-inhibition-her3-64nr3peg）

酪氨酸激酶抑制剂拉帕替尼的细胞内抑制作用及通过总 HER3 定量进行归一化

将人乳腺癌细胞和 SKBR3 细胞（人乳腺癌细胞系）用不同浓度的拉帕替尼（一种小分子酪氨酸激酶抑制剂）预处理 30 分钟，随后用 100 纳摩尔每升调蛋白 Beta1 刺激 10 分钟。

（标注：assay-validation-her3-total-1）
（标注：assay-validation-her3-total-2）

单克隆抗体的抑制作用及通过总 HER3 定量进行归一化

将人乳腺癌 BXPC3 细胞用不同浓度的单克隆抗体 X 或单克隆抗体 Y 预处理 30 分钟，随后用 100 纳摩尔每升调蛋白 Beta1 刺激 10 分钟。HER3 磷酸化水平的变化以总 HER3 为参照进行归一化处理。上述两种单克隆抗体均由法国蒙彼利埃 IRCM 研究所的 Thierry Chardès 博士友好提供。

（标注：assay-validation-her3-total-3）
（标注：assay-validation-her3-total-4）

简化通路

HER3 表皮生长因子信号通路

HER3 是一种受体酪氨酸激酶，属于表皮生长因子受体（EGFR）家族中的 ErbB 亚家族。HER3 定位于细胞表面，是目前已知的 EGFR 家族中唯一尚未发现配体的成员。HER3 受体激活后，会诱导其自身酪氨酸 1289 位点发生自身磷酸化。该磷酸化位点可为多种衔接蛋白、激酶及磷酸酶提供结合位点，进而激活下游多条信号转导通路。HER3/ErbB 受体可调控多种生物学过程，如细胞增殖、分化、存活、黏附、迁移及血管生成。HER3 的过度激活与癌症相关，这使其成为抗癌治疗的关键靶点；而 HER3 与 HER2 形成异源二聚体，会进一步增强癌症的侵袭性。

（标注：phospho-pathway-her3-epidermal-growth-factor-64nr3peg）

规格参数

其他规格

应用领域：细胞信号传导
品牌：HTRF
检测方式：均相时间分辨荧光
兼容裂解缓冲液：
- 4 号裂解缓冲液
- 5 号裂解缓冲液
分子修饰类型：总蛋白
产品类别：试剂盒
样品体积：16 微升
运输条件：干冰运输
靶标类别：磷酸化蛋白
靶标物种：人
技术原理：时间分辨荧光共振能量转移
治疗领域：肿瘤学与炎症
单位规格：500 个检测点

没有数据

货号：64NR3PEG

一键复制

参考价格 ¥ 29723.99

产品规格

请咨询￥29723.99

参考货期：3-4周

选择数量

当前规格1件起购

加入购物车询价