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HTRF A-SYNUCLEIN TOTAL KIT - 50K PTS

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品牌： Revvity

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概述

总 α- 突触核蛋白细胞检测试剂盒旨在监测 α- 突触核蛋白（包括磷酸化和非磷酸化形式）的表达水平。该试剂盒使用与我们的磷酸化 α- 突触核蛋白试剂盒相同的缓冲液，能够从单个样本中同时分析磷酸化蛋白和总蛋白，从而更好地理解 α- 突触核蛋白介导的发病机制。

α- 突触核蛋白与突触核蛋白病的发生发展相关，这类神经退行性疾病包括帕金森病（PD）、路易体痴呆（DLB）、弥漫性路易体病（DLBD）和多系统萎缩（MSA）。

工作原理

总 α- 突触核蛋白检测原理

总 α- 突触核蛋白检测可对细胞裂解物中突触核蛋白的表达水平进行定量分析。与蛋白质印迹法（Western Blot）不同，该检测完全基于微孔板进行，无需凝胶、电泳或转膜步骤。

总 α- 突触核蛋白检测使用两种标记抗体：一种偶联供体荧光团，另一种偶联受体。两种抗体都对该蛋白上的特定表位具有高度特异性。当细胞提取物中存在突触核蛋白时，加入这些偶联物会使供体荧光团与受体紧密靠近，从而产生 FRET 信号。信号强度与样本中蛋白质的浓度直接成正比，并且在无需洗涤的检测形式下即可评估蛋白质的表达。

总突触核蛋白 2 板检测方案

2 板方案包括在 96 孔板中培养细胞，裂解后将裂解物转移到 384 孔小体积检测板中，然后加入总突触核蛋白 HTRF 检测试剂。

该方案能够监测细胞活力和汇合度。

总 α- 突触核蛋白 1 板检测方案

使用 HTRF 试剂检测总 α- 突触核蛋白可在单个培养板中完成，该培养板可用于细胞培养、刺激和裂解，无需洗涤步骤。

这种为高通量筛选（HTS）设计的方案能够实现微型化，同时保持稳定的 HTRF 检测质量。

检测验证

通过 HTRF 定量分析发现，HeLa 细胞中的 α- 突触核蛋白水平比 SH-SY5Y 细胞更丰富
HeLa 细胞和 SH-SY5Y 细胞接种后，在 37°C、5% CO₂条件下培养至汇合。细胞裂解后，将裂解物进行系列稀释，然后使用 BCA 试剂定量总蛋白含量，同时使用 HTRF 总 α- 突触核蛋白细胞检测试剂盒定量 α- 突触核蛋白。
特异性定量 α- 突触核蛋白，而非 β- 突触核蛋白
HTRF 总 α- 突触核蛋白检测不会检测到 β- 突触核蛋白。

简化通路

帕金森病通路与 α- 突触核蛋白的作用

α- 突触核蛋白是突触核蛋白病患者脑内细胞内纤维状聚集体的主要成分。

该蛋白是帕金森病、路易体痴呆或多系统萎缩的关键分子标志物。α- 突触核蛋白在 Ser129 位点的广泛磷酸化也与病理事件相关。

规格参数

应用：细胞信号传导
品牌：HTRF
检测方式：HTRF
分子修饰：总蛋白
产品类别：试剂盒
样本体积：16 µL
运输条件：干冰运输
靶标类别：磷酸化蛋白
靶标物种：人
技术：时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）
治疗领域：神经科学
单位规格：50,000 个检测点

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货号：6FNSYPEY

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