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HTRF A-SYNUCLEIN P-S129 KIT - 10K PTS

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概述

HTRF 磷酸化 α- 突触核蛋白（Ser129）细胞检测试剂盒是定量内源性在丝氨酸 129（Ser129）位点磷酸化的 α- 突触核蛋白的理想工具。

α- 突触核蛋白参与突触核蛋白病的发病机制，这类神经退行性疾病包括帕金森病（PD）、路易体痴呆（DLB）、弥漫性路易体病（DLBD）和多系统萎缩（MSA）。

工作原理

磷酸化突触核蛋白（Ser129）检测原理

磷酸化 α- 突触核蛋白（Ser129）检测用于测量在 Ser129 位点磷酸化的突触核蛋白。与蛋白质印迹法（Western Blot）不同，该检测完全基于微孔板进行，无需凝胶、电泳或转膜步骤。

该检测使用两种标记抗体：一种偶联供体荧光团，另一种偶联受体荧光团。第一种抗体经筛选可特异性结合蛋白质上的磷酸化基序，第二种抗体则能识别该蛋白质，且不受其磷酸化状态影响。蛋白质磷酸化会促使两种标记抗体形成免疫复合物，使供体荧光团与受体荧光团靠近，从而产生 FRET（荧光共振能量转移）信号。信号强度与样品中磷酸化蛋白质的浓度直接成正比，且无需洗涤步骤即可评估蛋白质的磷酸化状态。

磷酸化 α- 突触核蛋白（Ser129）双板检测方案

双板方案包括：先在 96 孔板中培养细胞，裂解后将裂解物转移至 384 孔小体积检测板，再加入磷酸化 α- 突触核蛋白（Ser129）HTRF 检测试剂。该方案能够监测细胞活力和汇合度。

磷酸化 α- 突触核蛋白（Ser129）单板检测方案

使用 HTRF 试剂检测磷酸化 α- 突触核蛋白（Ser129）可在单个平板中完成，该平板可用于细胞培养、刺激和裂解，无需洗涤步骤。这种为高通量筛选（HTS）设计的方案支持微型化操作，同时保持稳定的 HTRF 检测质量。

检测验证

人源样本中 α- 突触核蛋白在 Ser129 位点的磷酸化

将编码 α- 突触核蛋白的质粒转染 HEK293 细胞，接种后用非磷酸化原纤维处理。细胞裂解后，通过 HTRF 对不同稀释度的裂解物进行分析。

在路易体病患者的人脑匀浆中检测到了 α- 突触核蛋白的磷酸化。

小鼠样本中 α- 突触核蛋白在 Ser129 位点的磷酸化

在野生型（WT）小鼠的原代神经元中检测到了 α- 突触核蛋白的磷酸化。

经非磷酸化原纤维处理的诱导型重组小鼠 N2A 细胞中，α- 突触核蛋白呈现高磷酸化水平。

简化通路

帕金森病通路与 α- 突触核蛋白的作用

在突触核蛋白病患者的大脑中，α- 突触核蛋白是细胞内纤维状聚集体的主要成分，是帕金森病、路易体痴呆或多系统萎缩的关键分子标志。此外，α- 突触核蛋白在 Ser129 位点的广泛磷酸化也与病理过程相关。

规格参数

其他规格
应用领域：细胞信号传导
品牌：HTRF
检测方式：HTRF
裂解缓冲液兼容性：裂解缓冲液 1、裂解缓冲液 2、裂解缓冲液 3、裂解缓冲液 4、裂解缓冲液 5
分子修饰：磷酸化
产品类别：试剂盒
样本体积：16 µL
运输条件：干冰运输
靶标类别：磷酸化蛋白
靶标物种：人、小鼠
技术：时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）
治疗领域：神经科学
单位规格：10,000 次检测

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货号：6FSYNPEH

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