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HTRF A-SYNUCLEIN P-S129 KIT - 50K PTS

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概述

HTRF 磷酸化 α- 突触核蛋白（Ser129）细胞检测试剂盒是定量内源性在丝氨酸 129 位磷酸化的磷酸化 α- 突触核蛋白的理想选择。

α- 突触核蛋白参与突触核蛋白病的发病机制，突触核蛋白病是一组神经退行性疾病，包括帕金森病（PD）、路易体痴呆（DLB）、弥漫性路易体病（DLBD）和多系统萎缩（MSA）。

工作原理
磷酸化突触核蛋白（Ser129）检测原理
磷酸化 α- 突触核蛋白（Ser129）检测用于测量在 Ser129 位磷酸化的突触核蛋白。与蛋白质印迹法不同，该检测完全基于微孔板，不需要凝胶、电泳或转膜步骤。

磷酸化突触核蛋白（Ser129）检测使用两种标记抗体：一种带有供体荧光团，另一种带有受体荧光团。第一种抗体经筛选可特异性结合蛋白质上的磷酸化基序，第二种抗体则能识别该蛋白质，且不受其磷酸化状态的影响。蛋白质磷酸化会促使形成包含两种标记抗体的免疫复合物，使供体荧光团与受体荧光团接近，从而产生 FRET 信号。信号强度与样品中磷酸化蛋白质的浓度直接成正比，且在无需洗涤的检测形式下，可用于评估蛋白质的磷酸化状态。

磷酸化 α- 突触核蛋白（Ser129）双板检测方案
双板方案包括在 96 孔板中培养细胞，然后裂解细胞，将裂解物转移到 384 孔小体积检测板中，再加入磷酸化 α- 突触核蛋白（Ser129）HTRF 检测试剂。

该方案能够监测细胞活力和融合度。

磷酸化 α- 突触核蛋白（Ser129）单板检测方案
使用 HTRF 试剂检测磷酸化 α- 突触核蛋白（Ser129）可在单个板中进行，该板可用于细胞培养、刺激和裂解。无需洗涤步骤。

这种为高通量筛选（HTS）设计的方案能够实现小型化，同时保持稳定的 HTRF 检测质量。

检测验证
人样本中 α- 突触核蛋白在丝氨酸 129 位的磷酸化
将编码 α- 突触核蛋白的质粒转染 HEK293 细胞，然后接种并用非磷酸化原纤维处理。细胞裂解后，通过 HTRF 对不同稀释度的裂解物进行分析。

在路易体病患者的人脑匀浆中检测到了 α- 突触核蛋白的磷酸化。

小鼠样本中 α- 突触核蛋白在丝氨酸 129 位的磷酸化
在从野生型小鼠获取的原代神经元上检测到了 α- 突触核蛋白的磷酸化。

经非磷酸化原纤维处理的可诱导重组小鼠 N2A 细胞显示出高水平的 α- 突触核蛋白磷酸化。

简化通路
帕金森病通路与 α- 突触核蛋白的作用
α- 突触核蛋白是突触核蛋白病患者大脑中细胞内纤维状聚集体的主要成分。该蛋白质是帕金森病、路易体痴呆或多系统萎缩的关键分子标志。α- 突触核蛋白在 Ser129 位的广泛磷酸化也与病理事件相关。

规格

其他规格
应用领域：细胞信号传导
品牌：HTRF
检测方式：HTRF
分子修饰：磷酸化
产品类别：试剂盒
样本体积：16 µL
运输条件：干冰运输
靶标类别：磷酸化蛋白质
靶标物种：人、小鼠
技术：时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）
治疗领域：神经科学
单位规格：50,000 个检测点

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货号：6FSYNPEY

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