当前位置：首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > Second messengers > HTRF B-ARRESTIN 2 TOTAL KIT - 1K PTS 总β抑制蛋白2蛋白检测试剂盒

HTRF B-ARRESTIN 2 TOTAL KIT - 1K PTS 总β抑制蛋白2蛋白检测试剂盒

分享给好友

rvty_ls_sds_64BAR2TPEB_US rvty_ls_sds_64BAR2TPEB_UK rvty_ls_sds_64BAR2TPEB_SPA rvty_ls_sds_64BAR2TPEB_ITA rvty_ls_sds_64BAR2TPEB_ELL rvty_ls_sds_64BAR2TPEB_DEU rvty_ls_sds_64BAR2TPEB_FRA

收藏咨询

品牌： Revvity

产品详情
相关解决方案
相关资源
相关视频
相关问答

概述

总 β- 抑制蛋白 2 检测可监测总 β- 抑制蛋白 2，用于检测多种细胞中内源性或过表达的 β- 抑制蛋白 2 的表达。β- 抑制蛋白 2 属于 β- 抑制蛋白家族，已知参与 G 蛋白偶联受体介导的脱敏作用，并能特异性减弱细胞对激素、神经递质或感觉信号等刺激的反应。由于 β- 抑制蛋白 2 在多种组织中表达，人们认为它可能通过影响受体介导的信号传导，在多种癌症或其他人类疾病（如糖尿病）中发挥重要作用。

工作原理

总 β- 抑制蛋白 2 检测原理

总 β- 抑制蛋白 2 检测可对细胞裂解物中 β- 抑制蛋白 2 的表达水平进行定量。与蛋白质印迹法不同，该检测完全基于微孔板进行，无需凝胶、电泳或转膜步骤。该检测使用两种标记抗体：一种偶联供体荧光团，另一种偶联受体荧光团。两种抗体都对该蛋白上的特定表位具有高度特异性。当细胞提取物中存在 β- 抑制蛋白 2 时，加入这些偶联物会使供体荧光团与受体荧光团靠近，从而产生 FRET 信号。信号强度与样品中蛋白质的浓度直接成正比，且该检测采用无需洗涤的格式，为评估蛋白质表达提供了便利。

总 β- 抑制蛋白 2 双板检测方案

使用 HTRF 试剂检测总 β- 抑制蛋白 2 可在单个板中完成，该板可用于细胞培养、刺激和裂解。无需洗涤步骤。这种为高通量筛选设计的方案能够实现小型化，同时保持稳定的 HTRF 检测质量。

HTRF 总 BRD2 检测的双板方案

总 β- 抑制蛋白 2 单板检测方案

HTRF 总 BRD2 检测的单板方案

检测验证

HTRF 总 β- 抑制蛋白 2 检测与蛋白质印迹法的比较

将 HEK293 细胞在含完全培养基的 T175 培养瓶中培养，置于 37°C、5% CO₂条件下。孵育 72 小时后，加入 3 mL 4 号裂解缓冲液（1X），在室温下轻轻振荡裂解细胞 30 分钟。

使用裂解缓冲液对细胞裂解物进行系列稀释，将 13 µL 各稀释液转移到小体积白色微孔板中，然后加入 3 µL 裂解缓冲液和 4 µL HTRF 总 β- 抑制蛋白 2 检测试剂。取等量的裂解物进行蛋白质印迹法和 HTRF 检测的平行比较。

蛋白质印迹法和 HTRF 检测的平行比较表明，至少在这些实验条件下，HTRF 检测的灵敏度是蛋白质印迹法的 4 倍。

HTRF 总 β- 抑制蛋白 2 检测的物种兼容性

将人（HEK293）、仓鼠（CHO-K1）和小鼠（C2C12）细胞以 100,000 个细胞 / 孔的密度接种在 96 孔板的细胞培养基中，在 37°C、5% CO₂条件下孵育 24 小时。然后移除培养基，加入 50 µL 裂解缓冲液，在室温下轻轻振荡裂解细胞 30 分钟。将 16 µL 裂解物转移到 384 孔小体积白色微孔板中，并加入 4 µL HTRF 总 β- 抑制蛋白 2 检测试剂。在室温下孵育 3 小时后，记录 HTRF 信号。

表达水平与文献数据以及用与 HTRF 检测相同的细胞进行的 qPCR 实验结果高度相关。

简化通路

GPCR 信号传导的简化通路及 β- 抑制蛋白的作用

β- 抑制蛋白通过调节激动剂介导的 GPCR 信号传导，在 GPCR 信号通路中发挥核心作用。在 β- 抑制蛋白的诸多功能中，它们既介导受体的脱敏和复敏过程，又充当 MAPK 通路（如 MAPK1/3 或 AKT1）的信号支架，还参与将泛素 - 蛋白连接酶招募到受体上。β- 抑制蛋白作为多价衔接蛋白，可将 GPCR 从 G 蛋白信号模式（从质膜传递短期信号）转换为 β- 抑制蛋白信号模式，这种模式传递的一系列独特信号在受体内化并转运至细胞内区室时启动。

在 GPCR 脱敏过程中，β- 抑制蛋白与 GRK 磷酸化的受体结合，通过空间位阻阻止其与 G 蛋白偶联。

β- 抑制蛋白作为内吞衔接蛋白，将许多受体靶向进行内化，并将 GPCR 招募到网格蛋白包被小窝中的衔接蛋白 2 复合物 2（AP-2）中。内化的抑制蛋白 - 受体复合物转运至细胞内的内体。此外，根据受体和细胞类型的不同，抑制蛋白介导的内化方式也有所不同。

受体复敏需要移除与受体结合的抑制蛋白，以便受体去磷酸化并返回质膜。

β- 抑制蛋白的参与程度似乎因受体、激动剂和细胞类型的不同而有显著差异。

规格参数

其他规格

应用领域：蛋白质定量
品牌：HTRF
检测方式：HTRF
分子修饰：总蛋白
产品类别：试剂盒
样品体积：16 µL
运输条件：干冰运输
靶标类别：G 蛋白偶联受体（GPCR）
靶标物种：人、小鼠
技术：时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）
治疗领域：心血管疾病、炎症、代谢 / 糖尿病、非酒精性脂肪性肝炎 / 纤维化
单位规格：1,000 个检测点

没有数据

货号：64BAR2TPEB

一键复制

参考价格 ¥ 41352.57

产品规格

1盒/1000测试￥41352.57

参考货期：3-4周

选择数量

当前规格1件起购

加入购物车询价