CXCR4 是 C-X-C 趋化因子 CXCL12/SDF-1 的受体。有充分证据表明,CXCR4 参与造血作用和心脏室间隔的形成。该受体在胃肠道血管形成中也发挥着重要作用。CXCR4 还可作为人类免疫缺陷病毒 1 型(HIV-1)的辅助受体。
该 HEK293 稳定细胞系表达与 SNAP 标签融合的 CXCR4 受体。经铽标记后,这些细胞可用于 Tag-lite 受体结合实验流程。
SNAP 标签(SNAP-tag®)是一种小型融合标签,能与特定底物发生共价相互作用。它可对任何目标蛋白进行特异性共价标记。有关更多详细信息,请参见标记步骤。
使用 Tag-lite 进行受体结合实验十分简便。只需向每个孔中加入 10 µL 标记细胞,然后加入 5 µL 标记配体和 5 µL 待测试化合物即可。与所有 HTRF 实验一样,Tag-lite 实验无需任何洗涤步骤。右侧给出了需遵循的实验流程示意图。
饱和结合实验用于在平衡条件下,针对浓度不断增加的配体,测量总结合和非特异性结合。进行该实验时,将荧光配体滴定到含有固定量标记细胞的溶液中,然后孵育至平衡。通过这种滴定获得的 HTRF 比值即为总结合。
竞争性结合实验用于测量解离常数(Ki)。进行该实验时,将化合物滴定到含有固定浓度荧光配体和固定量细胞的溶液中。
使用在 Tag-lite 缓冲液(LABMED)中经铽标记的表达趋化因子 CXCR4 受体的稳定细胞(HEK 细胞)及其匹配的荧光配体(L0012RED)所获得的数据示例。AMD-3100 被用作参考配体。不同的 HTRF® 兼容读数仪得出的结果可能有所不同。
- 应用领域:受体 - 配体结合
- 品牌:Tag-lite
- 检测方式:HTRF
- 产品类别:细胞
- 运输条件:干冰运输
- 靶标类别:G 蛋白偶联受体(GPCR)
- 技术:时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)
- 治疗领域:心血管疾病、传染病、代谢 / 糖尿病、非酒精性脂肪性肝炎 / 纤维化、神经科学、肿瘤与炎症、罕见病
- 单位规格:1 个