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HTRF PSNAP-A2B ADENOSINE RECEPTOR

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品牌： Revvity

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概述

过去几年中，SNAP-Tag 技术与 TR-FRET 相结合，为许多非放射性、无需洗涤的结合测定法的发展铺平了道路。该方法基于使用编码 SNAP-Tag 的质粒转染细胞，随后用铽标记。Revvity 提供了大量此类质粒。所有 GPCR 基因都克隆在 CMV 启动子下游的表达载体中，可直接用于蛋白质表达和标记。

本页面上的所有信息均涉及克隆了腺苷 A2B 受体的 Tag-lite 质粒。

工作原理
步骤 1 - 质粒转染
使用标准转染技术（参考瞬时转染方案）在您的细胞系中瞬时表达目标 SNAP-GPCR。

步骤 2 - 受体标记
SNAP-tag® 是一种小型融合标签，可与特定底物发生共价相互作用。它能够对任何目标蛋白质进行特异性共价标记（参考标记步骤）。所提供的细胞未经过标记，在进行结合测定前需要用 Lumi4 - 铽进行标记。Revvity 产品目录中提供 4 种不同规格的标记试剂。

步骤 3 - 了解测定原理
使用 Tag-lite 进行受体结合测定非常简便。只需向每个孔中加入 10 µL 标记细胞，随后加入 5 µL 标记配体和 5 µL 您要测试的化合物即可。与所有 HTRF 测定一样，Tag-lite 测定无需任何洗涤步骤。右侧提供了所要遵循的操作流程示意图。

步骤 4 - 饱和结合（KD）
饱和结合测定用于在平衡条件下，针对不断增加的配体浓度测量总结合和非特异性结合。进行该测定时，将荧光配体滴定到含有固定量标记细胞的溶液中，然后孵育至平衡状态。通过该滴定获得的 HTRF 比值即为总结合。

步骤 5 - 竞争性结合（KI）
竞争性结合测定用于测量解离常数 Ki。进行该测定时，将化合物滴定到含有固定浓度荧光配体和固定量细胞的溶液中。

规格

其他规格
应用
受体 - 配体结合
品牌
Tag-lite
检测方式
HTRF
产品类别
质粒
运输条件
干冰运输
目标类别
GPCR
技术
TR-FRET
治疗领域
心血管
传染病
炎症
代谢 / 糖尿病
非酒精性脂肪性肝炎 / 纤维化
神经科学
肿瘤学与炎症
罕见病
单位规格
1 单位

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