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LANCE ULTRA HADIPONECTIN,LYOPHILI(1.0UG)

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上海普纳生物技术有限公司
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将人 HeLa 细胞接种到 T175 培养瓶中，在 37°C、5% CO₂条件下培养至汇合。然后用 50ng/mL 的 IL4 处理细胞 20 分钟，随后裂解。用补充的裂解缓冲液对细胞裂解物进行系列稀释，将 16µL 各稀释液转移至低体积白色微孔板中，再加入 4µL HTRF 磷酸化 STAT6 检测试剂。取等量裂解物，采用 HTRF 与蛋白质印迹法进行平行比较。使用 HTRF 磷酸化 STAT6（Tyr641）检测时，每孔 5,000 个细胞即可检测到信号，而蛋白质印迹法（ECL 检测）则需要 40,000 个细胞。结果表明，HTRF 磷酸化 STAT6 检测的灵敏度是蛋白质印迹法的 8 倍。


7assay-validation-stat6-phospho-y641-4.svg（比较示意图）


简化通路

STAT6 的功能与调控

细胞因子和生长因子通过受体相关激酶 JAK 使 STAT6 磷酸化。磷酸化后的 STAT6 形成同源二聚体或异源二聚体，并转运至细胞核，介导细胞因子诱导的基因表达。白细胞介素 4 是触发 STAT6 酪氨酸 641 位点磷酸化的主要细胞因子，可诱导 BCL2L1/BCL-X (L) 的表达，而该基因与 IL4 的抗凋亡活性相关。此外，TBK1 介导的 STAT6 磷酸化与 STING 通路相关，在病毒感染引发的先天免疫中发挥作用。


8phospho-pathway-stat6-phospho-y641-kit-64at6peghy.svg（通路示意图）


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