产品概述

山羊抗人免疫血清中的免疫球蛋白 G（IgG）经免疫纯化后标记 d2 荧光基团，即多克隆抗体抗人 IgG-d2（PAb Anti Human IgG-d2）。该试剂可用于检测未标记的人特异性抗体与靶分子或免疫球蛋白融合蛋白的结合情况，适用于生化和细胞水平的多种相互作用研究，包括蛋白 / 蛋白、蛋白 / 多肽、蛋白 / DNA、蛋白 / RNA、蛋白 / 碳水化合物、蛋白 / 小分子、受体 / 配体等相互作用检测。HTRF 技术可覆盖从皮摩尔（picomolar）到低毫摩尔（low millimolar）范围的亲和力常数检测。

工作原理

检测原理

在 HTRF 相互作用检测中，一对相互作用的分子分别（直接或间接）标记供体荧光团和受体荧光团，信号强度与两者的结合程度成正比。本试剂应用示例：抗人 IgG-d2 多克隆抗体与含有人 Fc 融合标签的分子 A 结合，而分子 B * 与标记 HTRF 供体的特异性抗体结合（* 分子 B 也可进行生物素化、带标签、Fc 融合修饰，此时需使用相应的 HTRF 供体标记试剂，如抗标签抗体、抗种属抗体、蛋白 A、链霉亲和素等进行检测）。（标注：PPI how it works assay principle htrf pab anti human igg d2 61hfcdaa 为图表标识，对应 “抗人 IgG-d2 HTRF 检测原理”）

检测流程

以下为终体积 20 µL 的检测流程示例，用于检测含有人 Fc 融合标签的分子 A 与非标记分子 B * 的相互作用：

1. 加入两种相互作用分子（10 µL），孵育；
2. 加入抗人 IgG-d2 多克隆抗体（5 µL）和供体标记的抗分子 B 抗体（5 µL），孵育后读取信号。（* 分子 B 也可进行生物素化、带标签、Fc 融合修饰或直接标记，此时需使用相应的 HTRF 供体标记试剂，如抗标签抗体、抗种属抗体、蛋白 A、链霉亲和素等进行检测）

（标注：PPI how it works assay protocol htrf pab anti-human igg d2 为图表标识，对应 “抗人 IgG-d2 HTRF 检测流程”）

检测详情

定制专属 HTRF 相互作用检测方案

• 试剂按检测次数（20 µL 反应体系 / 次）销售，XL665 或 d2 标记抗体的供应标准为每孔 20 ng 抗体，产品说明书中会注明每瓶试剂的活性成分含量及标记物数量（活性成分为偶联物的活性部分，如抗体）。
• 检测次数与活性成分的关系：每孔偶联物的平均用量反映总生物材料含量，优先参考活性成分含量（而非总偶联物量）。对于铕穴状化合物（Cryptate）和 d2 标记偶联物，由于标记物分子量可忽略，总偶联物量与活性成分量相等；而 XL665 标记偶联物的总偶联物量会因 XL665 偶联摩尔比不同而变化，但 Revvity 提供的活性成分量恒定，且与订购的检测次数匹配。

推荐的铕穴状化合物与 XL665 偶联物用量

• 铕穴状化合物偶联物不可过量，避免导致检测仪饱和及背景信号过高，多数情况下 1–5 nM 的浓度为宜，根据 HTRF 兼容检测仪的不同，在 620 nm 波长下可产生 20,000–80,000 cps 的信号。
• XL665 偶联物的浓度需尽可能与检测靶点浓度匹配，以确保最大数量的生物分子被 XL665 受体标记。例如，若检测靶点的 assay 浓度为 20 nM，抗标签 - XL665 偶联物的浓度应达到等摩尔或更高水平。

产品规格

• 应用领域：蛋白 - 蛋白相互作用检测（Protein-Protein Interaction）
• 品牌：HTRF
• 检测方式：HTRF（均相时间分辨荧光）
• 产品类别：荧光试剂（Fluorescent Reagent）
• 运输条件：干冰运输（Shipped in Dry Ice）
• 靶标类别：生物制品（Biologics）
• 靶标物种：人（Human）
• 技术平台：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）
• 治疗领域：心血管疾病（Cardiovascular）、感染性疾病（Infectious Diseases）、炎症（Inflammation）、代谢 / 糖尿病（Metabolism/Diabetes）、非酒精性脂肪性肝炎 / 纤维化（NASH/Fibrosis）、神经科学（Neuroscience）、肿瘤学与炎症（Oncology & Inflammation）、罕见病（Rare Diseases）
• 单位规格：5,000 次检测（5,000 assay points）