HTRF PAB ANTI HUMAN IGG-EU - 20K PTS 免疫球蛋白K测量试剂 -20°C，000测试

产品概述

该产品的活性成分源于山羊抗人免疫血清，其含有的免疫球蛋白 G（IgG）经免疫纯化处理后，标记上铕（Eu）元素构成的铕穴状化合物，形成多克隆抗体抗人 IgG - 铕穴状化合物。此试剂可精准检测未标记的人特异性抗体与靶分子，或是免疫球蛋白融合蛋白之间的结合情况。它适用于生化与细胞两种实验形式，能助力研究多种物质间的相互作用，涵盖蛋白与蛋白、蛋白与多肽、蛋白与 DNA、蛋白与 RNA、蛋白与碳水化合物、蛋白与小分子以及受体与配体的相互作用。依托 HTRF 技术，该试剂检测亲和力常数的范围十分宽泛，可从皮摩尔级别延伸至低毫摩尔级别，适配不同强度的分子相互作用检测场景。

工作原理

检测原理

在 HTRF 相互作用检测体系中，参与相互作用的两种分子，需分别通过直接或间接的方式，对应标记供体荧光团和受体荧光团，检测产生的信号强度和这两种分子的结合程度呈正相关。以本试剂应用为例，抗人 IgG - 铕穴状化合物多克隆抗体会和带有人 Fc 融合标签的分子 A 特异性结合，而分子 B * 则会与标记了 HTRF 受体的特异性抗体相结合。若分子 B 经过生物素化、带标签、Fc 融合等修饰，可选用对应的 HTRF 受体标记试剂，像抗标签抗体、抗种属抗体、蛋白 A、链霉亲和素等完成后续检测。（标注：PPI How it works assay principle htrf pab anti human igg eu cryptate 61hfckla 为图表标识，对应 “抗人 IgG - 铕穴状化合物 HTRF 检测原理”）

检测流程

以下是终反应体积为 20 微升的标准检测流程，专门用于检测带有人 Fc 融合标签的分子 A 和非标记分子 B * 之间的相互作用，具体步骤如下：

1. 向检测板内加入两种待检测相互作用的分子，总体积 10 微升，随后进行孵育；
2. 加入 5 微升抗人 IgG - 铕穴状化合物多克隆抗体以及 5 微升受体标记的抗分子 B 抗体，孵育结束后，借助适配 HTRF 技术的检测仪读取信号即可。

若分子 B 经过生物素化、带标签、Fc 融合修饰，或是直接做了标记，需替换为对应的 HTRF 受体标记试剂，如抗标签抗体、抗种属抗体等完成检测操作。（标注：PPI How it works assay protocol htrf pab anti human igg eu cryptate 61hfckla 为图表标识，对应 “抗人 IgG - 铕穴状化合物 HTRF 检测流程”）

检测详情

检测次数与活性成分的关联

每孔中偶联物的平均用量，能反映出检测时生物材料的总负载量。实际实验里，相较于关注总偶联物质量，优先参考活性成分含量更为合理。对于铕穴状化合物和 d2 标记的偶联物，由于标记物的分子量极小，几乎可以忽略不计，所以这类偶联物的总质量和活性成分质量基本一致。而 XL665 标记的偶联物，其总质量会随着 XL665 与抗体的最终摩尔偶联比变化而改变。不过 Revvity 提供的该类偶联物，其活性成分含量始终保持恒定，且严格依据订购的检测次数来确定。

铕穴状化合物与 XL665 偶联物的推荐用量

• 铕穴状化合物偶联物：用量需严格把控，过量使用容易造成检测仪信号饱和，还会使背景信号超出可接受范围。多数实验中，1–5 纳摩尔 / 升的浓度是较为合适的，搭配适配 HTRF 技术的检测仪，在 620 纳米波长下，可产生 20,000–80,000 计数 / 秒的稳定信号。
• XL665 偶联物：为了让尽可能多的生物分子能被 XL665 受体标记，XL665 偶联物浓度要尽量和检测靶点浓度匹配。比如检测靶点在反应体系中的浓度为 20 纳摩尔 / 升时，抗标签 - XL665 偶联物的浓度需达到与之等摩尔或更高的水平。

产品规格

• 应用领域：蛋白 - 蛋白相互作用检测（Protein-Protein Interaction）
• 品牌：HTRF
• 检测方式：HTRF（均相时间分辨荧光）
• 产品类别：荧光试剂（Fluorescent Reagent）
• 运输条件：室温运输（Shipped Ambient）
• 靶标类别：生物制品（Biologics）
• 靶标物种：人（Human）
• 技术平台：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）
• 适用治疗领域：心血管疾病（Cardiovascular）、感染性疾病（Infectious Diseases）、炎症（Inflammation）、代谢 / 糖尿病（Metabolism/Diabetes）、非酒精性脂肪性肝炎 / 纤维化（NASH/Fibrosis）、神经科学（Neuroscience）、肿瘤学与炎症（Oncology & Inflammation）、罕见病（Rare Diseases）
• 单位规格：20,000 次检测（20,000 assay points）