品牌: Revvity
大量研究表明,乳腺癌组织中含有合成雌二醇(17β- 雌二醇)所需的酶,这种类固醇激素在乳腺癌的发生发展中发挥重要作用。乳腺癌组织中雌二醇的形成主要涉及两条通路:芳香化酶通路(将雄激素转化为雌激素)和硫酸酯酶通路(通过 17β- 羟类固醇脱氢酶 1(17β-HSD1)将雌酮转化为雌二醇)。本雌二醇检测试剂盒具有高特异性,可用于全细胞、细胞上清液或生化酶检测中雌二醇的定量分析。
本试剂盒基于竞争结合原理,包含两种关键试剂:一种是标记穴状化合物(Cryptate,供体)的特异性抗体,另一种是偶联 XL665(受体)的雌二醇。细胞产生的雌二醇或纯化的 17β-HSD1 酶催化生成的雌二醇,会与 XL665 标记的雌二醇竞争结合铕穴状化合物(Eu Cryptate)标记的抗雌二醇单克隆抗体。(标注:biomarkers-how-it-works-assay-principle-estradiol 为图表 / 文件标识,可译为 “生物标志物 - 雌二醇检测原理”)
雌二醇检测采用简化流程,仅需两步孵育:
细胞刺激后,仅需在室温下进行一次 2 小时孵育即可完成检测。(标注:biomarkers-how-it-works-assay-protocol-estradiol 为图表 / 文件标识,可译为 “生物标志物 - 雌二醇检测方案”)
(标注:specifications-estradiol 为图表 / 文件标识,可译为 “雌二醇检测规格”)
使用 HTRF 雌二醇检测试剂盒,对人乳腺癌细胞系 T-47D 进行雌酮刺激后的雌二醇生成检测。细胞刺激后,直接向细胞培养板中加入检测试剂。如图 2 所示,仅需 780 个细胞即可检测到雌二醇。该试剂盒可实现微型化检测,在单块板中完成实验且不损失检测性能,是筛选实验的理想工具。实验流程:将 T-47D 细胞按指定密度接种到 96 孔半孔板中,加入 50 µL 含 10 nM 雌酮的 MEM 培养基,孵育 20 小时。直接向培养细胞中加入雌二醇检测试剂,室温孵育 2 小时后读取荧光信号,通过标准曲线计算雌二醇浓度。(标注:assay-validation-estradiol 为图表 / 文件标识,可译为 “雌二醇检测验证”)