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中脑星形胶质细胞源性神经营养因子(MANF,Mesencephalic astrocyte-derived neurotrophic factor),又称 ARMET(即 “肿瘤早期富含精氨酸突变蛋白”,arginine-rich mutated in early stages of tumors),属于第四类神经营养因子。MANF 是一种定位于内质网(ER,endoplasmic reticulum)的驻留蛋白,在发育中的大脑皮层中高表达;在大鼠 6 - 羟基多巴胺帕金森病模型中,该蛋白对多巴胺能神经元具有重要的保护和修复作用。此外,MANF 还参与抵御多种形式的内质网应激。人源 MANF 检测试剂盒可实现对细胞上清液和血清中 MANF 的快速检测。
人源 MANF 的检测采用双抗夹心免疫分析法,该方法使用两种特异性人源 MANF 抗体,一种标记有铕 - 穴状化合物(供体,Europium Cryptate),另一种标记有 d2(受体)。检测信号的强度与样本中人源 MANF 的浓度呈正比。(图示:biomarkers-how-it-works-assay1.svg,MANF 检测原理相关图示)
MANF 检测采用简化的实验方案:在加入样本 / 校准品和抗体偶联物后,仅需进行一次孵育。标记有均相时间分辨荧光(HTRF,Homogeneous Time-Resolved Fluorescence)供体和受体的抗体可预先混合,通过单次加样步骤完成添加,进一步简化检测流程。该方案需在室温(RT,Room Temperature)下进行一次时长为 4 小时的孵育。(图示:biomarkers-how-it-works-assay2.svg,MANF 检测方案相关图示)