概述

肌球蛋白是基于肌动蛋白的马达蛋白，有助于真核细胞中收缩力的产生。每个肌肉肌球蛋白组装体包含一对肌球蛋白重链（MYH）和两对肌球蛋白轻链（MYL）。肌球蛋白重链 2（MyHC-2）是 II 类（或常规型）肌球蛋白重链的成员，在骨骼肌收缩中发挥作用。该检测方法能够检测细胞裂解物中的肌球蛋白重链，适用于骨骼肌疾病相关的研究。

工作原理

检测原理

肌球蛋白重链的检测采用夹心免疫分析法，该方法涉及两种特异性抗肌球蛋白重链抗体，分别标记有铕穴状化合物（供体）和 d2（受体）。信号强度与样品中肌球蛋白重链的浓度成正比。（附图：2biomarkers-how-it-works-assay-principle-myosin-heavy-chain-63adk098peg-63adk098peh-63adk098pej.svg）

检测方案

以下是肌球蛋白重链检测的具体方案：将细胞接种到 96 孔培养板中，进行刺激处理后，直接在同一培养板中裂解细胞。随后将裂解物转移至检测板，用于肌球蛋白重链的检测。该方案能够对细胞活力和融合度进行监测。此外，可将标记有 HTRF 荧光团的抗体预先混合，通过单次加样步骤加入，进一步简化检测流程。该检测可在 96 孔板至 384 孔板中进行，只需按比例调整各试剂的添加体积即可。（注：原文中 “Two-plate protocol of the HTRF total BRD2 assay” 与上下文 “肌球蛋白重链检测方案” 无关，推测为文本错植，故未纳入翻译）

检测验证

C2C12 细胞中肌球蛋白重链的检测

在含有不同百分比胎牛血清（FBS）或马血清（FS）的培养基中培养 C2C12 细胞，以诱导 C2C12 成肌细胞分化为肌管。培养 4 天或 8 天后，吸弃培养基，加入 1× 裂解缓冲液，在室温下轻轻振荡 30 分钟以制备裂解物。取 16 微升裂解物转移至 384 孔白色底透微孔板中，再加入 4 微升肌球蛋白重链检测试剂。在室温下孵育过夜后，记录 HTRF 信号。（附图：3assay-validation-myosin-heavy-chain-1.svg）

规格参数

其他规格

• 应用：蛋白质定量
• 品牌：HTRF
• 检测方式：HTRF
• 产品类别：试剂盒
• 样品体积：16 微升
• 运输条件：干冰运输
• 靶标类别：生物标志物
• 技术：时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）
• 治疗领域：心血管疾病、罕见病
• 单位规格：500 次检测用量