概述

本试剂盒旨在快速检测细胞上清液和完整细胞中的髓系细胞触发受体 2（TREM-2，全称为 Triggering Receptor Expressed on Myeloid Cells 2）。TREM 受体家族可调控免疫系统中多种细胞的活性，包括中性粒细胞、单核细胞 / 巨噬细胞、小胶质细胞和树突状细胞。研究已在人脑脊液（CSF，cerebrospinal fluid）中检测到可溶性 TREM-2（soluble TREM-2），且发现多发性硬化症（multiple sclerosis）及其他炎症性神经系统疾病（inflammatory neurological conditions）患者体内的可溶性 TREM-2 水平，高于无炎症性神经系统疾病（without inflammatory neurologic disorders）的患者。

工作原理

检测原理

人源 TREM-2 的检测采用双抗夹心免疫分析法（sandwich immunoassay），该方法使用两种特异性抗人源 TREM-2 抗体（specific anti-human TREM2 antibodies），分别标记有铕 - 穴状化合物（Europium Cryptate，供体）和 d2（受体）。检测信号的强度与样本中人源 TREM-2 的浓度呈正比。（图示：1biomarkers-how-it-works-assay-principle-myosin-heavy-chain-63adk098peg-63adk098peh-63adk098pej.svg，TREM-2 检测原理相关图示）

检测方案

右侧介绍了 TREM-2 检测的简易方案，该方案使用 384 孔小体积白色微孔板（最终反应体积为 20 微升）。将细胞上清液、样本或标准品直接加至检测板（assay plate）中，即可进行人源 TREM-2 的检测。标记有均相时间分辨荧光（HTRF，Homogeneous Time-Resolved Fluorescence）供体和受体的抗体可预先混合，并通过单次加样（single dispensing step）步骤加入，以进一步简化检测流程。只需按比例调整各试剂的加样体积，该检测即可在 96 孔板至 384 孔板中进行。（图示：2biomarkers-how-it-works-assay-protocol-human-trem-2-63adk099peg-63adk099peh-63adk099pej.svg，TREM-2 检测方案相关图示）

检测验证

THP-1 细胞上清液中 TREM-2 的检测

向 THP-1 细胞中加入 100 纳摩尔（nM）的佛波酯（PMA，phorbol 12-myristate 13-acetate）诱导细胞分化，使细胞贴壁生长（adherent）。每孔最终反应体积为 200 微升，在 37°C 条件下刺激（stimulation）72 小时。随后收集分化组（differentiated）和未分化组（un-differentiated）细胞的上清液，用于本试剂盒检测。为确保浓度插值（concentration interpolation）准确，还对多种细胞密度（cell densities）进行了评估。结果显示，经 PMA 诱导分化的 THP-1 细胞，其 TREM-2 受体的表达水平更高。（图示：3assay-validation-trem2-1.svg，THP-1 细胞上清液中 TREM-2 检测相关图示）

洗涤处理后可溶性 TREM-2 的定量检测

将三种不同细胞密度的 THP-1 细胞接种（seeded）到 96 孔板中，加入 100 纳摩尔（nM）的佛波酯（PMA）诱导细胞分化并贴壁。每孔最终反应体积为 200 微升，在 37°C 条件下刺激 72 小时。随后收集细胞上清液，用于可溶性 TREM-2 的定量检测；对贴壁细胞用完全细胞培养基（complete cell culture medium）洗涤 3 次后，收集最终上清液用于可溶性 TREM-2 检测；最后将细胞在 37°C 条件下孵育（incubated）24 小时，收集最终样本。为确保浓度插值准确，对每个样本均进行了多种稀释度（dilutions）的评估。结果表明，经 PMA 诱导 THP-1 细胞分化后，TREM-2 受体高表达且会发生切割（cleaved）；洗涤处理可去除残留的可溶性 TREM-2，而额外 24 小时的孵育则可检测到新释放（newly released）的可溶性 TREM-2。（图示：4assay-validation-trem2-2.svg，洗涤处理后可溶性 TREM-2 定量检测相关图示）

简化通路

人源 TREM-2 试剂盒相关简化通路TREM-2 全称为髓系细胞触发受体 2（Triggering Receptor Expressed on Myeloid Cells 2）。TREM 受体家族可调控免疫系统中多种细胞的活性，包括中性粒细胞、单核细胞 / 巨噬细胞、小胶质细胞和树突状细胞。TREM-2 需借助衔接蛋白 DAP12（adaptor protein DAP12）实现下游信号传导（downstream signaling）。TREM-2 的胞外结构域（extracellular part）可被切割，形成可溶性 TREM-2，该蛋白已在人脑脊液（CSF）中被检测到。研究发现，多发性硬化症及其他炎症性神经系统疾病患者体内的可溶性 TREM-2 水平，高于无炎症性神经系统疾病的患者。（图示：5biomarkers-tab4-trem2-simplified-pathway-63adk099peg-63adk099peh-63adk099pey.svg，TREM-2 简化通路相关图示）

规格参数

其他规格

• 应用领域（Application）：蛋白质定量（Protein Quantification）
• 品牌（Brand）：HTRF
• 检测方式（Detection Modality）：HTRF（均相时间分辨荧光技术）
• 产品类别（Product Group）：试剂盒（Kit）
• 样本体积（Sample Volume）：16 微升（16 µL）
• 运输条件（Shipping Conditions）：干冰运输（Shipped in Dry Ice）
• 靶标类别（Target Class）：生物标志物（Biomarkers）
• 靶标物种（Target Species）：人（Human）
• 技术平台（Technology）：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移技术，Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer）
• 治疗领域（Therapeutic Area）：神经科学（Neuroscience）、肿瘤学与炎症（Oncology & Inflammation）
• 单位规格（Unit Size）：10000 个检测点（10,000 assay points）