品牌: Revvity
tau 蛋白需通过与微管蛋白结合来稳定微管。tau 蛋白的表达异常、聚集及后续的磷酸化,已被证实与阿尔茨海默病、帕金森病等神经系统相关疾病的发病存在关联。本 tau 蛋白聚集检测试剂盒可在脑组织和细胞培养物中快速检测人源 tau 蛋白聚集体,且该试剂盒隶属于我们的 tau 蛋白系列产品,该系列还包含磷酸化 tau 蛋白检测试剂盒与总 tau 蛋白检测试剂盒(MAP-Tau)。
tau 蛋白聚集体的检测采用双抗夹心免疫分析技术,所用抗 tau 单克隆抗体对 tau 蛋白聚集体具有特异性,且该抗体标记有铽 - 穴状化合物(terbium-Cryptate)或 d2 荧光基团,能确保检测质量、结果可重复性及信号质量。检测过程中产生的特异性 HTRF 信号强度与 tau 蛋白聚集体的含量呈正相关。(图示:Biomarkers assay principle tau,tau 蛋白检测原理相关图示)
将样本或脑组织提取物转移至检测板中,即可进行 tau 蛋白聚集体检测。标记有 HTRF 荧光团的抗体可预先混合,通过单次加样步骤加入,进一步简化检测流程。仅需按比例调整各试剂的添加体积,该检测即可在 96 孔板至 384 孔板中进行。(图示:Assay protocol tau,tau 蛋白检测方案相关图示)
当样本中存在 tau 蛋白聚集体时,会产生 FRET 信号,该信号与非聚集态 tau 蛋白产生的信号有明显区别,体现出良好的检测特异性。将纯化的重组 tau 蛋白聚集体用检测稀释液进行系列稀释后检测,结果显示信号强度与 tau 蛋白聚集体浓度呈良好线性相关,线性范围为 1.9-500 ng/mL。(图示:Specifications tau aggregation,tau 蛋白检测特异性与线性范围相关图示)
对重组全长人源 tau 蛋白进行化学诱导聚集处理,并在不同时间点(1 小时、2 小时、4 小时、6 小时、24 小时)终止反应。将各时间点的样本预先按 1:500 比例稀释后检测,以追踪 tau 蛋白的聚集动力学过程。此外,本试剂盒还可用于添加化合物后 tau 蛋白聚集体的解离动力学监测。该实验在 384 孔低体积检测板中进行,检测信号通过 PHERAstar FS 激光检测仪读取。(图示:Assay validation tau aggregation,tau 蛋白聚集动力学验证相关图示)