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前列腺素 E2(PGE2)由多种细胞类型通过前列腺素合酶,以花生四烯酸代谢的主要产物 —— 前列腺素 H2(PGH2)为前体合成。PGE2 具有多种生物学功能,如血管舒张和平滑肌松弛,并参与促炎和抗炎通路。PGE2 的产生是检测环氧合酶 1(COX-1)和环氧合酶 2(COX-2)调控作用的常用方法。该 PGE2 试剂盒是一种高灵敏度定量工具,可检测细胞上清液或直接检测完整细胞中的 PGE2。
PGE2 检测基于竞争结合原理:细胞产生的天然 PGE2 与 d2 标记的 PGE2 竞争结合铕穴状化合物(Europium Cryptate)标记的抗 PGE2 单克隆抗体。该检测可适用于多种样本类型,如细胞上清液或纯化酶。(标注:prostaglandin-e2-kit 为图表标识,对应 “前列腺素 E2 试剂盒”)
PGE2 检测流程简化,仅需在加入样本和 PGE2 检测试剂后进行一次孵育步骤,具体为室温下孵育 5 小时。(标注:prostaglandin-e2-kit 为图表标识,对应 “前列腺素 E2 试剂盒”)
PGE2 检测具有高度灵活性,可使用细胞上清液检测或直接对受刺激细胞进行检测;加入检测试剂后的孵育时间和温度对检测结果影响极小,进一步提升了实验灵活性。
(标注:prostaglandin-e2-kit 为图表标识,对应 “前列腺素 E2 试剂盒”)
HTRF PGE2 检测的优势之一是可在细胞存在的情况下直接定量 PGE2,且不影响检测性能 —— 直接细胞检测与上清液转移检测的结果无显著差异。在有无吲哚美辛(已知的 PGE2 产生抑制剂)存在的条件下,刺激单核细胞产生 PGE2。通过 HTRF 技术测定的吲哚美辛半数抑制浓度(IC50)为 1.0±0.4 nM,与已发表数据一致。(标注:prostaglandin-e2-kit 为图表标识,对应 “前列腺素 E2 试剂盒”)