产品概述

穿孔素（Perforin，又称细胞溶素或淋巴细胞成孔蛋白）存在于细胞毒性淋巴细胞、自然杀伤细胞（NK 细胞）和细胞毒性 T 细胞中。穿孔素可在细胞膜上形成孔道，允许颗粒酶 B 进入靶细胞细胞质，通过激活半胱天冬酶触发细胞凋亡。该试剂盒用于快速检测细胞上清液和完整细胞中的人穿孔素，支持高通量检测且无需任何洗涤步骤，相比酶联免疫吸附试验（ELISA）节省时间。

工作原理

检测原理

人穿孔素的检测采用夹心免疫分析技术，涉及两种特异性抗人穿孔素抗体：一种标记铕穴状化合物（Europium Cryptate，供体），另一种标记 d2（受体）。信号强度与样本中穿孔素的浓度呈正比。（标注：1biomarkers-how-it-works-assay-principle-perforin-63adk100peg-63adk100peh-63adk100pej.svg 为图表标识，对应 “人穿孔素检测原理”）

检测流程

检测采用 384 孔小体积白色板或 Revvity 低体积 96 孔板（终体积 20 µL），具体流程如下：取 16 µL 细胞上清液、样本或标准品直接加入检测板，使用 HTRF 试剂进行检测。标记 HTRF 供体和受体的抗体可预先混合，通过单次加样步骤加入，进一步简化操作流程；按比例调整试剂体积即可适配 96 孔至 384 孔板格式。（标注：2biomarkers-how-it-works-assay-protocol-perforin-63adk100peg-63adk100peh-63adk100pej.svg 为图表标识，对应 “人穿孔素检测流程”）

分析性能

• 样本量：16 µL
• 检测限（LOD）与定量限（LOQ）（稀释液中）：0.1 ng/mL 和 0.25 ng/mL
• 检测范围：0.25–100 ng/mL
• 出结果时间：室温下过夜（ON at RT）

（标注：3assay-validation-human-perforin-std-curve.svg 为图表标识，对应 “人穿孔素标准曲线”）

检测验证

细胞上清液中穿孔素的检测（双板方案）

将不同密度的 TALL-104 细胞（效应细胞）以悬浮状态接种于 96 孔板，每孔 50 µL，在 37°C、5% CO₂条件下培养 24 小时。培养后取 16 µL 细胞上清液转移至 384 孔小体积白色微孔板，加入 4 µL HTRF 穿孔素和颗粒酶 B 检测试剂，室温过夜孵育后记录 HTRF 信号。（标注：4assay-validation-human-perforin-1-1.svg 为图表标识，对应 “细胞上清液穿孔素检测结果”）

产品规格

• 应用领域：蛋白定量（Protein Quantification）
• 品牌：HTRF
• 检测方式：HTRF（均相时间分辨荧光）
• 产品类别：试剂盒（Kit）
• 样本体积：16 µL
• 运输条件：干冰运输（Shipped in Dry Ice）
• 靶标类别：生物标志物（Biomarkers）
• 靶标物种：人（Human）
• 技术平台：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）
• 治疗领域：肿瘤学与炎症（Oncology & Inflammation）
• 单位规格：100,000 次检测（100,000 assay points）