产品概述

组织金属蛋白酶抑制剂 1（TIMP1，又称 TIMP-1）是金属蛋白酶组织抑制剂（TIMP）家族的内源性胞外抑制剂，该家族已知包含 4 种亚型（TIMP1-TIMP4）。TIMP1 在细胞外基质（ECM）组成中发挥关键作用，是胞外基质降解的核心调节剂，通过与基质金属蛋白酶（MMPs，如 MMP-2、MMP-9）形成 1:1 复合物，不可逆地抑制其活性。在细胞培养上清液和生物体液中，TIMP1 以游离形式（未结合态）或 TIMP1-MMP 紧密复合物形式存在。TIMP 家族维持着基质降解与合成的平衡，MMPs/TIMPs 失衡会导致细胞外基质过度沉积，引发纤维化进程。

工作原理

检测原理

人 TIMP1 的检测采用夹心免疫分析技术，涉及两种特异性抗人 TIMP1 抗体，分别标记 HTRF 供体染料和受体染料。检测信号强度与样本中 TIMP1 的浓度直接成正比。（标注：Assay principle timp 为图表标识，对应 “人 TIMP1 检测原理”）

检测流程

检测采用 384 孔小体积白色板或 96 孔低体积板（终体积 20 µL），流程如下：取 16 µL 细胞上清液、样本或标准品直接加入检测板，使用 HTRF 试剂进行检测。标记 HTRF 供体和受体的抗体可预先混合，单次加样简化操作流程；按比例调整各试剂添加体积，即可适配 96 孔至 384 孔板格式。注意：唾液中 TIMP1 含量较高，操作时需采取必要的个人防护装备（PPE）预防污染（如佩戴口罩和手套）。（标注：Assay protocol timp1 为图表标识，对应 “人 TIMP1 检测流程”）

分析性能

核心检测参数

• 样本量：16 µL
• 检测终体积：20 µL
• 出结果时间：室温下过夜（ON at RT）
• 试剂盒组件：冷冻标准品、冷冻检测抗体、缓冲液及实验方案
• 检测限（LOD）与定量限（LOQ）（稀释液中）：0.15 ng/mL 和 0.63 ng/mL
• 检测范围：0.8–50 ng/mL
• 靶标物种：仅人（Human only）
• 特异性：与人 TIMP2、TIMP3 无交叉反应

检测精密度

批内精密度（n=24）

• 样本 1：平均 TIMP1 浓度 1.09 ng/mL，变异系数（CV）5.5%
• 样本 2：平均 TIMP1 浓度 5.90 ng/mL，CV 1.9%
• 样本 3：平均 TIMP1 浓度 20.5 ng/mL，CV 2.1%
• 平均 CV：3.7%注：3 个样本各检测 24 次，计算每个样本浓度的 CV 值。

批间精密度（n=4）

• 样本 1：TIMP1 浓度 0.89 ng/mL，平均 delta R 值 114，CV 12%
• 样本 2：TIMP1 浓度 6.6 ng/mL，平均 delta R 值 1102，CV 5%
• 样本 3：TIMP1 浓度 26.9 ng/mL，平均 delta R 值 4666，CV 3%
• 平均 CV：6%注：每个样本在 4 个独立实验中检测，计算每个样本浓度的 CV 值。

检测验证

两种人细胞系中 TIMP1 的表达检测

将 IMR90 细胞（人胎儿肺成肌纤维细胞，1.6×10⁶个细胞）和 LX2 细胞 *（人肝星状细胞，2.7×10⁶个细胞）分别接种于 T75 培养瓶（每组设 2 个复瓶），使用含 10% 胎牛血清（FCS）的 DMEM 培养基培养。3 天后更换为含 0.2% 牛血清白蛋白（BSA）的 DMEM 培养基，细胞分为未刺激组和 TGFβ1（10 ng/mL）刺激组，继续培养 3 天。收集各培养瓶上清液，用试剂盒提供的稀释液 1:16 稀释后，按照人 TIMP1 试剂盒流程进行定量检测。* 注：LX2 细胞由 EMD Millipore 提供，产品编号 #SCC064（标注：assay validation human timp 为图表标识，对应 “人细胞系 TIMP1 表达检测结果”）

HTRF 试剂盒与商用 ELISA 的相关性验证

取 MRC5、IMR90 和 LX2 * 细胞的上清液（未刺激组或 TGF-β1 处理组，在无 FBS 培养基 + 0.2% BSA 中培养 48 小时），采用人 TIMP1 HTRF 试剂盒与商用 ELISA 进行平行对比检测。结果显示，两种方法的相关性极高，相关系数（r）接近 1。* 注：LX2 细胞由 EMD Millipore 提供，产品编号 #SCC064（标注：Assay validation human timp 为图表标识，对应 “HTRF 与 ELISA 相关性验证结果”）

产品规格

• 应用领域：蛋白定量（Protein Quantification）
• 品牌：HTRF
• 检测方式：HTRF（均相时间分辨荧光）
• 产品类别：试剂盒（Kit）
• 样本体积：16 µL
• 运输条件：干冰运输（Shipped in Dry Ice）
• 靶标类别：生物标志物（Biomarkers）
• 靶标物种：人（Human）
• 技术平台：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）
• 治疗领域：非酒精性脂肪性肝炎 / 纤维化（NASH/Fibrosis）、肿瘤学与炎症（Oncology & Inflammation）
• 单位规格：100,000 次检测（100,000 assay points）