核心结论

小鼠 IFN-β（干扰素 β）检测试剂盒是基于 HTRF 技术的均相定量工具，专为小鼠样本设计，灵敏度达 4 pg/mL、精密度优异，可精准量化病毒感染及 STING 通路激活相关的 IFN-β 分泌，操作简便且支持高通量检测，适配肿瘤学与炎症相关研究，尤其适用于先天免疫、抗病毒机制及 STING 通路调节剂筛选等场景。

产品概述

I 型干扰素（包括干扰素 α/IFN-α 和干扰素 β/IFN-β）在抗病原体先天免疫应答中发挥核心作用。IFN-β 主要由成纤维细胞、巨噬细胞、树突状细胞及内皮细胞产生，其基因表达受模式识别受体（如 Toll 样受体）下游的 IRF-3、c-Jun/ATF-2、NF-κB 等转录因子调控，是 cGAS-cGAMP-STING 通路激活的主要功能性读出指标。IFN-β 分泌后结合并激活 IFNAR1/IFNAR2 受体复合物，依赖 STAT1/2 转录因子启动下游信号，磷酸化的 STAT1/2 可诱导抗病毒基因表达，进而发挥免疫防御作用。

工作原理

检测原理

样本（细胞上清液等）直接加入检测板（384 孔低体积白色板或 Revvity 低体积 96 孔板），终体积 20 µL。HTRF 供体和受体标记的抗体已预混，单次加样即可完成反应，大幅简化操作流程。检测可灵活适配至 1536 孔板格式，仅需按比例调整各试剂添加体积。（标注：1cytokines-how-it-works-assay-principle-human-il13-62hil13peg-62hil13peh.svg 为原文引用图表标识，实际应为 “细胞因子 - 小鼠 IFN-β 检测原理”）

数据分析

推荐使用 4 参数逻辑（4PL）曲线拟合标准曲线，相比线性分析，能在更宽浓度范围内准确量化未知样本，完美适配细胞因子分泌等生物系统分析场景。Revvity 与Myassays.com合作提供专业数据分析支持，可通过对应链接获取免费在线 IFN-β 分析软件，如需了解 HTRF 数据处理及 4PL 1/y² 拟合相关内容，可参考对应资料。

检测详情

技术规格

• 样本量：16 µL
• 最终检测体积：20 µL
• 试剂盒组分：冻干标准品、冷冻检测抗体、缓冲液及实验方案
• 检测限（LOD）（稀释液中）：4 pg/mL
• 定量限（LOQ）（稀释液中）：17 pg/mL
• 检测范围：17–2000 pg/mL
• 出结果时间：室温过夜（Overnight at RT）
• 适用物种：仅小鼠（Mouse only）

分析性能

批内精密度（n=24）

• 每个样本重复检测 24 次，计算浓度变异系数（% CV）
• 样本 1：IFN-β 均值 75 pg/mL，CV 10%
• 样本 2：IFN-β 均值 200 pg/mL，CV 3%
• 样本 3：IFN-β 均值 1125 pg/mL，CV 3%
• 平均 CV：5.3%，体现优异的实验重复性

批间精密度（n=6）

• 每个样本在 6 个独立实验中检测，计算浓度变异系数（% CV）
• 样本 1：IFN-β 均值 58 pg/mL，CV 3.6%
• 样本 2：IFN-β 均值 348 pg/mL，CV 3.3%
• 样本 3：IFN-β 均值 1092 pg/mL，CV 7.3%
• 平均 CV：4.7%，确保不同实验批次间的结果稳定性

检测验证

1. STING 特异性激动剂 CMA 和 DMXAA 诱导 NIH-3T3 成纤维细胞释放 IFN-β

• 实验流程：小鼠 NIH-3T3 成纤维细胞以 1×10⁵个 / 孔接种到 96 孔板，孵育 6 小时；加入 200 µM 小鼠 STING 特异性合成激动剂 CMA 和 DMXAA（终体积 100 µL / 孔），孵育 24 小时后收集上清液，按试剂盒说明书流程检测 IFN-β 分泌水平。

（标注：1assay-validation-mouse-ifn-beta-1.svg 为图表标识，对应 “NIH-3T3 细胞 IFN-β 分泌验证”）

2. 多种 STING 激动剂处理 RAW 264.7 巨噬细胞诱导 IFN-β 分泌

• 实验流程：小鼠 RAW 264.7 巨噬细胞以 1×10⁵个 / 孔接种到 96 孔板，过夜孵育；加入固定浓度的 STING 合成激动剂（CMA、DMXAA、ADUS100）及内源性 STING 激动剂 2'3'-cGAMP（终体积 100 µL / 孔），孵育 24 小时后收集上清液，按试剂盒说明书流程检测 IFN-β 分泌水平。

（标注：2assay-validation-mouse-ifn-beta-2.svg 为图表标识，对应 “RAW 264.7 细胞 IFN-β 分泌验证（多种激动剂）”）

3. 2'3'-cGAMP 和 ADUS100 剂量依赖性诱导 RAW 264.7 巨噬细胞释放 IFN-β

• 实验流程：小鼠 RAW 264.7 巨噬细胞以 1×10⁵个 / 孔接种到 96 孔板，孵育 5 小时；加入梯度浓度的内源性 STING 激动剂 2'3'-cGAMP 或合成小分子激动剂 ADUS100（终体积 100 µL / 孔），过夜孵育后收集上清液，按试剂盒说明书流程检测 IFN-β 分泌水平。

（标注：3assay-validation-mouse-ifn-beta-3.svg 为图表标识，对应 “RAW 264.7 细胞 IFN-β 分泌验证（剂量依赖性）”）

产品规格

• 应用领域：Protein Quantification（蛋白定量）
• 品牌：HTRF
• 检测方式：HTRF（均相时间分辨荧光）
• 产品类别：Kit（试剂盒）
• 样本体积：16 µL
• 运输条件：干冰运输（Shipped in Dry Ice）
• 靶标类别：Cytokines（细胞因子）
• 靶标物种：Mouse（小鼠）
• 技术平台：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）
• 治疗领域：Oncology & Inflammation（肿瘤学与炎症）
• 单位规格：100,000 次检测（100,000 assay points）