产品概述

干扰素 γ（IFN-γ）是一种促炎细胞因子，由 T 细胞和自然杀伤（NK）细胞在病毒感染或炎症状态下分泌。它在先天和适应性免疫中发挥核心作用，可促进 T 细胞分化为 TH1 细胞、调节调节性 T 细胞（Treg）发育，同时抑制 T 细胞向 TH17 细胞分化。其抗肿瘤特性已应用于骨质疏松治疗，在肿瘤免疫领域也备受关注，可提高膀胱癌或卵巢癌患者的生存率。血清样本检测通常需要更高的灵敏度，AlphaLISA 检测技术的灵敏度足以检测血清或血浆中低水平的分析物。

工作原理

检测原理

将细胞上清液、样本或标准品直接加入检测板（384 孔低体积白色板或 Cisbio 低体积 96 孔板，终体积 20 µL），随后使用 HTRF 试剂进行检测。标记 HTRF 供体和受体的抗体已预先混合，可通过单次加样步骤加入，进一步简化检测流程。仅需按比例调整各试剂的添加体积，检测即可适配至 1536 孔板格式。（标注：IFN gamma kit assay principle 为图表 / 文件标识，可译为 “人源 IFN-γ 检测原理”）

检测数据分析

酶联免疫吸附试验（ELISA）标准曲线拟合通常推荐使用 4 参数逻辑（4PL）曲线。与线性分析相比，该回归模型能在更宽的浓度范围内准确量化未知样本，非常适合细胞因子释放等生物系统的分析。

检测详情

人源 IFN-γ 试剂盒技术规格

• 样本量：16 µL
• 最终检测体积：20 µL
• 试剂盒组分：冻干标准品、冷冻检测抗体、缓冲液及实验方案
• 检测限（LOD）与定量限（LOQ）（稀释液中）：14 pg/mL 与 21 pg/mL
• 检测范围：21–4000 pg/mL
• 出结果时间：室温过夜（Overnight at RT）
• 校准公式：NIBSC（82/587）值（IU/mL）= 0.019 × HTRF 人源 IFN-γ 值（pg/mL）（原文 “hIFN?” 为笔误，按逻辑修正）
• 适用物种：仅人（Human only）

分析性能

批内与批间精密度

批内精密度（n=24）

• 每个样本检测 24 次，计算各样本变异系数（% CV）
• 样本 1：IFN-γ 均值 209 pg/mL，变异系数（CV）9%
• 样本 2：IFN-γ 均值 835 pg/mL，变异系数（CV）11%
• 样本 3：IFN-γ 均值 4367 pg/mL，变异系数（CV）7%
• 平均 CV：9%

批间精密度（n=4）

• 每个样本在 4 个独立实验中检测，计算各样本变异系数（% CV）
• 样本 1：IFN-γ 含量 98 pg/mL，delta R 均值 178，变异系数（CV）14%
• 样本 2：IFN-γ 含量 432 pg/mL，delta R 均值 788，变异系数（CV）9%
• 样本 3：IFN-γ 含量 1905 pg/mL，delta R 均值 3170，变异系数（CV）6%
• 平均 CV：9.7%

稀释线性

• 样本 1：原液检测值 150 pg/mL；1:2.1 稀释预期 72.6 pg/mL，实测 66 pg/mL，回收率 91%；1:4.3 稀释预期 35 pg/mL，实测 30 pg/mL，回收率 86%；平均回收率 88%
• 样本 2：原液检测值 1953 pg/mL；1:2.1 稀释预期 942 pg/mL，实测 959 pg/mL，回收率 102%；1:4.3 稀释预期 454 pg/mL，实测 450 pg/mL，回收率 99%；平均回收率 100%
• 实验结果显示，该检测具有良好的稀释线性

加标回收

• 向两种不同血清样本中添加相同量的重组细胞因子（2000 pg/mL），通过标准曲线结果与预期值对比计算回收率
• 样本 1：预期总浓度 2421 pg/mL，实测 2086 pg/mL，回收率 86%
• 样本 2：预期总浓度 3360 pg/mL，实测 3363 pg/mL，回收率 100%
• 回收率接近 100%，验证了该检测的样本基质适用性

检测验证

PMA 和离子霉素刺激 PBMC 分泌 IFN-γ

将 PBMC 以 5×10⁴个 / 孔、1×10⁵个 / 孔、2×10⁵个 / 孔和 4×10⁵个 / 孔的密度接种，用含 500 ng/mL 离子霉素的梯度浓度佛波酯（PMA，0、1、50 ng/mL）刺激 3 小时。取 16 µL 上清液转移至 384 孔低体积白色检测板中，用人源 IFN-γ 检测试剂盒进行分析。（标注：IFN? secretion in PBMCs stimulated with PMA and Ionomycin 为图表 / 文件标识，可译为 “人源 IFN-γ 检测验证”）

产品规格

其他规格

• 应用领域：Protein Quantification（蛋白定量）
• 品牌：HTRF
• 检测方式：HTRF（均相时间分辨荧光）
• 产品类别：Kit（试剂盒）
• 样本体积：16 µL
• 运输条件：干冰运输（Shipped in Dry Ice）
• 靶标类别：Cytokines（细胞因子）
• 靶标物种：人（Human）
• 技术平台：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）
• 治疗领域：Oncology & Inflammation（肿瘤学与炎症）
• 单位规格：100,000 次检测（100,000 assay points）