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当前位置:首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > Cytokines > HTRF HUMAN IL2 KIT - 100K PTS

产品概述

白细胞介素 2(IL-2)的主要作用是通过影响 T 细胞调节细胞介导的免疫。它促进 T 细胞分化为效应 T 细胞或记忆 T 细胞,帮助机体抵抗感染。IL-2 也是肿瘤免疫领域的关键分子,因为它是 T 细胞分化为调节性 T 细胞(Treg)的主要促进因子。血清样本检测通常需要更高的灵敏度,AlphaLISA 检测技术的灵敏度足以检测血清或血浆中低水平的分析物。

工作原理

检测原理

将细胞上清液、样本或标准品直接加入检测板(384 孔低体积白色板或 Cisbio 低体积 96 孔板,终体积 20 µL),随后使用 HTRF 试剂进行检测。标记 HTRF 供体和受体的抗体已预先混合,可通过单次加样步骤加入,进一步简化检测流程。仅需按比例调整各试剂的添加体积,检测即可适配至 1536 孔板格式。(标注:IL2 kit assay principle 为图表 / 文件标识,可译为 “人源 IL-2 检测原理”)

检测数据分析

酶联免疫吸附试验(ELISA)标准曲线拟合通常推荐使用 4 参数逻辑(4PL)曲线。与线性分析相比,该回归模型能在更宽的浓度范围内准确量化未知样本,非常适合细胞因子释放等生物系统的分析。


检测详情

人源 IL-2 试剂盒技术规格

  • 样本量:16 µL
  • 最终检测体积:20 µL
  • 试剂盒组分:冻干标准品、冷冻检测抗体、缓冲液及实验方案
  • 检测限(LOD)与定量限(LOQ)(稀释液中):7 pg/mL 与 37 pg/mL
  • 检测范围:37–8000 pg/mL
  • 出结果时间:室温 3 小时(3h at RT)
  • 校准公式:NIBSC(86/500)值(IU/mL)= 0.01 × HTRF 人源 IL-2 值(pg/mL)
  • 适用物种:仅人(Human only)

分析性能

批内与批间精密度

批内精密度(n=24)

  • 每个样本检测 24 次,计算各样本变异系数(% CV)
  • 样本 1:IL-2 均值 75 pg/mL,变异系数(CV)7%
  • 样本 2:IL-2 均值 2997 pg/mL,变异系数(CV)3%
  • 样本 3:IL-2 均值 6136 pg/mL,变异系数(CV)2%
  • 平均 CV:4%

批间精密度(n=4)

  • 每个样本在 4 个独立实验中检测,计算各样本变异系数(% CV)
  • 样本 1:IL-2 含量 98 pg/mL,delta R 均值 346,变异系数(CV)12%
  • 样本 2:IL-2 含量 432 pg/mL,delta R 均值 1576,变异系数(CV)12%
  • 样本 3:IL-2 含量 1904 pg/mL,delta R 均值 5911,变异系数(CV)10%
  • 平均 CV:11%

检测验证

抗 CD3 和 CD28 刺激 Jurkat 细胞分泌 IL-2

将 Jurkat 细胞以 5×10⁴个 / 孔和 1×10⁵个 / 孔的密度接种,用 10 µg/mL 抗 CD3 抗体和 1 µg/mL 抗 CD28 抗体刺激 24 小时。取 16 µL 上清液转移至 384 孔低体积白色检测板中,用人源 IL-2 检测试剂盒进行分析。(标注:IL2 secretion in Jurkat cells stimulated with anti CD3 and CD28 为图表 / 文件标识,可译为 “人源 IL-2 检测验证 1”)

抗 CD3 和 CD28 剂量反应对 IL-2 分泌的影响

将 Jurkat 细胞以 2×10⁵个 / 孔的密度接种,用梯度浓度的抗 CD3 抗体(0、0.5、1、10 µg/mL)和抗 CD28 抗体(0、1、5、10、20 µg/mL)刺激 24 小时。取 16 µL 上清液转移至 384 孔低体积白色检测板中,用人源 IL-2 检测试剂盒进行分析。(标注:Anti CD3 and CD28 dose response effect on IL2 secretion 为图表 / 文件标识,可译为 “人源 IL-2 检测验证 2”)


产品规格

其他规格

  • 应用领域:Protein Quantification(蛋白定量)
  • 品牌:HTRF
  • 检测方式:HTRF(均相时间分辨荧光)
  • 产品类别:Kit(试剂盒)
  • 样本体积:16 µL
  • 运输条件:干冰运输(Shipped in Dry Ice)
  • 靶标类别:Cytokines(细胞因子)
  • 靶标物种:人(Human)
  • 技术平台:TR-FRET(时间分辨荧光共振能量转移)
  • 治疗领域:Neuroscience(神经科学)、Oncology & Inflammation(肿瘤学与炎症)
  • 单位规格:100,000 次检测(100,000 assay points)


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货号:62HIL02PEJ
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