产品概述

白细胞介素 6（IL-6）是一种促炎细胞因子，参与急性期反应、炎症过程和肿瘤进展，由 T 细胞、巨噬细胞和成纤维细胞分泌，可诱导 B 细胞和 T 细胞增殖。其研究覆盖糖尿病、阿尔茨海默病、抑郁症及多种癌症等多个领域，与转化生长因子 β（TGF-β）共同作为 T 细胞分化为 TH17 细胞的主要促进因子，是肿瘤免疫领域的新研究方向。血清样本检测通常需要更高的灵敏度，AlphaLISA 检测技术的灵敏度足以检测血清或血浆中低水平的分析物。

工作原理

检测原理

将细胞上清液、样本或标准品直接加入检测板（384 孔低体积白色板或 Revvity 低体积 96 孔板，终体积 20 µL），随后使用 HTRF 试剂进行检测。标记 HTRF 供体和受体的抗体已预先混合，可通过单次加样步骤加入，进一步简化检测流程。仅需按比例调整各试剂的添加体积，检测即可适配至 1536 孔板格式。（标注：Assay principle human il6 为图表 / 文件标识，可译为 “人源 IL-6 检测原理”）

检测数据分析

酶联免疫吸附试验（ELISA）标准曲线拟合通常推荐使用 4 参数逻辑（4PL）曲线。与线性分析相比，该回归模型能在更宽的浓度范围内准确量化未知样本，非常适合细胞因子释放等生物系统的分析。

检测详情

人源 IL-6 试剂盒技术规格

• 样本量：16 µL
• 最终检测体积：20 µL
• 试剂盒组分：冻干标准品、冷冻检测抗体、缓冲液及实验方案
• 检测限（LOD）与定量限（LOQ）（稀释液中）：8 pg/mL 与 34 pg/mL
• 检测范围：34–7500 pg/mL
• 出结果时间：室温 2 小时（2h at RT）
• 校准公式：NIBSC（89/548）值（IU/mL）= 0.1 × HTRF 人源 IL-6 值（pg/mL）
• 适用物种：仅人（Human only）

分析性能

批内与批间精密度

批内精密度（n=24）

• 每个样本检测 24 次，计算各样本变异系数（% CV）
• 样本 1：IL-6 均值 384 pg/mL，变异系数（CV）5%
• 样本 2：IL-6 均值 2522 pg/mL，变异系数（CV）3%
• 样本 3：IL-6 均值 8594 pg/mL，变异系数（CV）3%
• 平均 CV：4%

批间精密度（n=4）

• 每个样本在 4 个独立实验中检测，计算各样本变异系数（% CV）
• 样本 1：IL-6 含量 116.5 pg/mL，delta R 均值 400，变异系数（CV）13%
• 样本 2：IL-6 含量 268 pg/mL，delta R 均值 1805，变异系数（CV）10%
• 样本 3：IL-6 含量 3261 pg/mL，delta R 均值 7834，变异系数（CV）2%
• 平均 CV：8%

稀释线性

• 样本 1：原液检测值 2015 pg/mL；1:4.3 稀释回收率 104%、1:7.4 稀释回收率 108%、1:10.7 稀释回收率 111%；平均回收率 108%
• 样本 2：原液检测值 354 pg/mL；1:4.3 稀释回收率 101%、1:7.4 稀释回收率 94%；平均回收率 97%
• 实验结果显示，该检测具有良好的稀释线性

加标回收

• 向血清样本中添加重组细胞因子（3250 pg/mL），预期总浓度 4098 pg/mL，实测 4103 pg/mL，回收率 100%
• 回收率达 100%，验证了该检测的样本基质适用性

检测验证

JTE607 抑制 THP1 细胞分泌 IL-6

将 THP1 细胞以 1×10⁵个 / 孔的密度接种，在含 2 µg/mL LPS 的条件下，用梯度浓度的 JTE607 孵育 18 小时。取 16 µL 上清液转移至 384 孔低体积白色检测板中，用人源 IL-6 检测试剂盒进行分析。（标注：assay validation human il6 为图表 / 文件标识，可译为 “人源 IL-6 检测验证 1”）

LPS 刺激 PBMC 分泌 IL-6

将 PBMC 以 5×10⁴个 / 孔、1×10⁵个 / 孔和 4×10⁵个 / 孔的密度接种，用梯度浓度的 LPS（0、0.02、0.2、2 µg/mL）刺激 18 小时。取 16 µL 上清液转移至 384 孔低体积白色检测板中，用人源 IL-6 检测试剂盒进行分析。（标注：assay validation human il6 为图表 / 文件标识，可译为 “人源 IL-6 检测验证 2”）

产品规格

其他规格

• 应用领域：Protein Quantification（蛋白定量）
• 品牌：HTRF
• 检测方式：HTRF（均相时间分辨荧光）
• 产品类别：Kit（试剂盒）
• 样本体积：16 µL
• 运输条件：干冰运输（Shipped in Dry Ice）
• 靶标类别：Cytokines（细胞因子）
• 靶标物种：人（Human）
• 技术平台：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）
• 治疗领域：Metabolism/Diabetes（代谢 / 糖尿病）、NASH/Fibrosis（非酒精性脂肪性肝炎 / 纤维化）、Neuroscience（神经科学）、Oncology & Inflammation（肿瘤学与炎症）
• 单位规格：100,000 次检测（100,000 assay points）