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当前位置:首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > Cytokines > HTRF HUMAN IL11 KIT - 100K PTS

产品概述

IL-11 属于 IL-6 家族细胞因子,可调节炎症反应,且会根据炎症微环境参与心血管疾病、癌症或肺纤维化的发生。它由成纤维细胞、上皮细胞、成骨细胞等多种基质细胞产生,在造血、抑制脂肪生成、抑制破骨细胞分化、促进组织纤维化、减轻组织损伤及调节 B 细胞功能等方面具有多种作用。分泌后,IL-11 会结合由 IL-11Ra 链与 gp130 共受体组成的受体复合物,触发 Jak/STAT 信号通路。HTRF 人源 IL-11 试剂盒是均相 “加样即读” 检测试剂盒,可测量细胞上清液中 IL-11 的分泌,是酶联免疫吸附试验(ELISA)的快速高效替代方案。

工作原理

检测原理

将细胞上清液、样本或标准品直接加入检测板(384 孔低体积白色板或 Revvity 低体积 96 孔板,终体积 20 µL),随后使用 HTRF 试剂进行检测。标记 HTRF 供体和受体的抗体已预先混合,可通过单次加样步骤加入,进一步简化检测流程。仅需按比例调整各试剂的添加体积,检测即可适配至 1536 孔板格式。(标注:cytokines-how-it-works-assay-principle-human 为图表 / 文件标识,可译为 “细胞因子 - 人源 IL-11 检测原理”)

检测数据分析

酶联免疫吸附试验(ELISA)标准曲线拟合通常推荐使用 4 参数逻辑(4PL)曲线。与线性分析相比,该回归模型能在更宽的浓度范围内准确量化未知样本,非常适合细胞因子释放等生物系统的分析。Revvity 已与Myassays.com合作,为你的数据分析提供支持。


检测详情

人源 IL-11 试剂盒技术规格

  • 样本量:16 µL
  • 最终检测体积:20 µL
  • 试剂盒组分:冻干标准品、冷冻检测抗体、缓冲液及实验方案
  • 检测限(LOD)与定量限(LOQ)(稀释液中):21 pg/mL 与 31 pg/mL
  • 检测范围:31–5000 pg/mL
  • 出结果时间:室温过夜(Overnight at RT)
  • 校准公式:NIBSC(92/788)值(UI/mL)= 0.0093 × HTRF 人源 IL-11 值(pg/mL)(原文 “UI” 为单位表述,按原文呈现)
  • 适用物种:仅人(Human only)

分析性能

批内与批间精密度

批内精密度(n=24)

  • 每个样本检测 24 次,计算各样本浓度变异系数(% CV)
  • 样本 1:IL-11 均值 78 pg/mL,变异系数(CV)11%
  • 样本 2:IL-11 均值 2500 pg/mL,变异系数(CV)3.1%
  • 样本 3:IL-11 均值 5000 pg/mL,变异系数(CV)3%
  • 平均 CV:5.7%

批间精密度(n=4)

  • 每个样本在 4 个独立实验中检测,计算各样本浓度变异系数(% CV)
  • 样本 1:IL-11 含量 329 pg/mL,delta R 均值 1311,变异系数(CV)9%
  • 样本 2:IL-11 含量 1361 pg/mL,delta R 均值 4404,变异系数(CV)14%
  • 样本 3:IL-11 含量 5516 pg/mL,delta R 均值 5516,变异系数(CV)14%
  • 平均 CV:12%

加标回收

  • 实验设计:向含已知浓度 IL-11 的 L15 Glutamax+1% BSA 细胞上清液中添加不同量的重组 IL-11,按 1:1 体积比混合,通过标准曲线结果与预期值对比计算回收率
  • 回收率范围为 91%–113%,验证了该检测的样本基质适用性

检测验证

TGF-β 刺激 MDA-MB 231 细胞分泌 IL-11

将人源 MDA-MB 231 细胞以 4×10⁵个 / 孔的密度接种到 96 孔板中,加入 100 µL 完全 L15 Glutamax 细胞培养基,在 37°C、常压二氧化碳浓度下过夜培养。随后用梯度浓度(0.05–100 µg/mL)的 TGF-β(溶于 200 µL 1% BSA L15 Glutamax 培养基)刺激细胞,24 小时后取 16 µL 上清液转移至白色检测板,用人源 IL-11 检测试剂盒进行分析,室温过夜孵育后读取 HTRF 信号。(标注:assay-validation-human 为图表 / 文件标识,可译为 “人源 IL-11 检测验证”)


产品规格

其他规格

  • 应用领域:Protein Quantification(蛋白定量)
  • 品牌:HTRF
  • 检测方式:HTRF(均相时间分辨荧光)
  • 产品类别:Kit(试剂盒)
  • 样本体积:16 µL
  • 运输条件:干冰运输(Shipped in Dry Ice)
  • 靶标类别:Cytokines(细胞因子)
  • 靶标物种:人(Human)
  • 技术平台:TR-FRET(时间分辨荧光共振能量转移)
  • 治疗领域:Inflammation(炎症)、NASH/Fibrosis(非酒精性脂肪性肝炎 / 纤维化)
  • 单位规格:100,000 次检测(100,000 assay points)


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