产品概述

白细胞介素 13（IL-13）在过敏性炎症、气道疾病和哮喘中起关键作用，可调节免疫球蛋白 E（IgE）合成、诱导 B 细胞抗体类别转换，还能促进初始 T 细胞分化为 TH2 细胞，其对免疫细胞的作用与 IL-4 相似（二级结构相近）。在免疫细胞外，IL-13 可诱导成纤维细胞产生基质金属蛋白酶（MMPs），避免过度过敏性炎症导致的窒息。人源 IL-13 由 TH2 细胞、CD4+ T 细胞、调节性 T 细胞（Treg）、自然杀伤（NK）细胞、肥大细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞及上皮细胞产生，分泌后结合 IL13Ra1，与 IL4Ra 形成 II 型 IL-4R 异源复合物，激活 Jak1、Tyk2 及下游 STAT3/6 信号通路。HTRF 人源 IL-13 试剂盒是均相 “加样即读” 检测试剂盒，可测量细胞上清液中 IL-13 的分泌，是酶联免疫吸附试验（ELISA）的快速高效替代方案。血清样本检测通常需要更高的灵敏度，AlphaLISA 检测技术的灵敏度足以检测血清或血浆中低水平的分析物。

工作原理

检测原理

将细胞上清液、样本或标准品直接加入检测板（384 孔低体积白色板或 Revvity 低体积 96 孔板，终体积 20 µL），随后使用 HTRF 试剂进行检测。标记 HTRF 供体和受体的抗体已预先混合，单次加样即可完成操作，简化流程。检测可适配至 1536 孔板格式，仅需按比例调整试剂体积。（标注：1cytokines-how-it-works-assay-principle-human-il13-62hil13peg-62hil13peh.svg 为图表 / 文件标识，可译为 “细胞因子 - 人源 IL-13 检测原理”）

检测数据分析

酶联免疫吸附试验（ELISA）标准曲线拟合通常推荐使用 4 参数逻辑（4PL）曲线。与线性分析相比，该回归模型能在更宽的浓度范围内准确量化未知样本，非常适合细胞因子释放等生物系统的分析。Revvity 可为数据分析提供支持，如需了解 HTRF 数据处理及 4PL 1/y² 拟合相关内容，可参考对应资料。

检测详情

试剂盒技术规格

• 样本量：16 µL
• 最终检测体积：20 µL
• 试剂盒组分：冻干标准品、冷冻检测抗体、缓冲液及实验方案
• 检测限（LOD）与定量限（LOQ）（稀释液中）：6 pg/mL 与 17 pg/mL
• 检测范围：17–5000 pg/mL
• 出结果时间：室温过夜（Overnight at RT）
• 校准公式：NIBSC（94/622）值（IU/mL）= 0.0012 × HTRF 人源 IL-13 值（pg/mL）
• 适用物种：仅人（Human only）

分析性能

批内与批间精密度

• 批内精密度（n=24）：3 个样本平均 CV 为 9%，每个样本检测 24 次。
  • 样本 1：IL-13 均值 50 pg/mL，变异系数（CV）8%
  • 样本 2：IL-13 均值 2500 pg/mL，变异系数（CV）10%
  • 样本 3：IL-13 均值 4000 pg/mL，变异系数（CV）9%
• 批间精密度（n=4）：3 个样本平均 CV 为 6%，每个样本在 4 个独立实验中检测。
  • 样本 1：IL-13 含量 78 pg/mL，delta R 均值 685，变异系数（CV）9%
  • 样本 2：IL-13 含量 411 pg/mL，delta R 均值 2780，变异系数（CV）5%
  • 样本 3：IL-13 含量 5000 pg/mL，delta R 均值 13729，变异系数（CV）3%

加标回收

• 实验设计：向含已知浓度 IL-13（1669 pg/mL）的 RPMI+10% FCS 细胞上清液中添加两种不同量的重组 IL-13，按 1:1 体积比混合，通过标准曲线结果与预期值对比计算回收率。
• 回收率均为 90%，验证了该检测的样本基质适用性。

检测验证

PHA 刺激 PBMC 分泌 IL-13

将人源 PBMC 以 1×10⁵个 / 孔的密度接种到 96 孔板中，加入 100 µL 完全 RPMI 细胞培养基，用梯度浓度（0.4–50 µg/mL）的植物血凝素（PHA）刺激。孵育 3 天后，取 16 µL 上清液转移至白色检测板，用人源 IL-13 检测试剂盒进行分析。（标注：2assay-validation-human-il13-1.svg 为图表 / 文件标识，可译为 “人源 IL-13 检测验证”）

产品规格

其他规格

• 应用领域：Protein Quantification（蛋白定量）
• 品牌：HTRF
• 检测方式：HTRF（均相时间分辨荧光）
• 产品类别：Kit（试剂盒）
• 样本体积：16 µL
• 运输条件：干冰运输（Shipped in Dry Ice）
• 靶标类别：Cytokines（细胞因子）
• 靶标物种：Human（人）
• 技术平台：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）
• 治疗领域：Inflammation（炎症）
• 单位规格：100,000 次检测（100,000 assay points）