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核心结论

人源 IL-1β 检测试剂盒是基于 HTRF 技术的均相定量工具,适用于细胞上清液、血清等样本检测,灵敏度高、特异性强,适配炎症和肿瘤相关研究,操作简便且支持高通量。

产品概述

IL-1β(又称白细胞热原或单核细胞因子)是 IL1 家族促炎细胞因子,作为主要内源性热原,可诱导前列腺素合成、激活 T/B 细胞并促进抗体产生,还能促进 T 细胞分化为 TH17。血清样本检测需高灵敏度,AlphaLISA 技术可满足低水平分析物检测需求;检测时需遵循推荐方案,避免使用严重溶血样本。

工作原理

检测原理

样本(细胞上清液、血清等)直接加入检测板(384 孔低体积白色板或 Revvity 低体积 96 孔板),终体积 20 µL。HTRF 供体和受体标记的抗体已预混,单次加样即可完成反应,大幅简化操作流程。检测可适配至 1536 孔板格式,仅需按比例调整试剂体积。(标注:1assay-principle-hp-il1-62hil1b2pet-62hil1b2peg-62hil1b2peh.svg 为图表标识,对应 “人源 IL-1β 检测原理”)

数据分析

推荐使用 4 参数逻辑(4PL)曲线拟合标准曲线,能在宽浓度范围内准确量化样本,适配细胞因子释放等生物系统分析。Revvity 与Myassays.com合作提供数据分析支持,可通过对应链接获取免费在线 IL-1β 分析软件,如需了解 HTRF 数据处理及 4PL 1/y² 拟合相关内容,可参考对应资料。


检测详情

技术规格

  • 样本量:16 µL
  • 最终检测体积:20 µL
  • 试剂盒组分:冻干标准品、冷冻检测抗体、缓冲液及实验方案
  • 检测限(LOD):稀释液中 8.3 pg/mL;DMEM+10% FCS 中 11.3 pg/mL;RPMI+10% FCS 中 15.3 pg/mL
  • 定量限(LOQ):稀释液中 18.8 pg/mL;DMEM+10% FCS 中 26.7 pg/mL;RPMI+10% FCS 中 28.5 pg/mL
  • 检测范围:75.8–6500 pg/mL
  • 出结果时间:室温 4 小时(4h at RT)
  • 校准公式:NIBSC(86/680)值(IU/mL)= 0.07 × HTRF 人源 IL-1β 值(pg/mL)
  • 适用物种:仅人(Human only)

分析性能

批内精密度(n=24)

  • 样本 1:IL-1β 均值 73.7 pg/mL,CV 7%
  • 样本 2:IL-1β 均值 714.4 pg/mL,CV 2%
  • 样本 3:IL-1β 均值 3406.8 pg/mL,CV 2%
  • 平均 CV:4%(每个样本检测 24 次)

批间精密度(n=4)

  • 样本 1:IL-1β 均值 76 pg/mL,CV 9%
  • 样本 2:IL-1β 均值 702 pg/mL,CV 8%
  • 样本 3:IL-1β 均值 3095 pg/mL,CV 4%
  • 平均 CV:7%(每个样本在 4 个独立实验中检测)

稀释线性

  • PBMC 上清液用试剂盒 DIL5 稀释液系列稀释,平均回收率 99%,显示良好的稀释线性。

加标回收

  • 向 PBMC 上清液中添加重组 IL-1β,平均回收率 93%,表明样本与试剂盒标准品的细胞因子检测结果一致性良好。

交叉反应

  • 人 IL-1β:100%;人 IL-1α:0%;小鼠 IL-1β:0%,检测具有人源特异性。

检测验证

THP1 细胞 IL-1β 分泌调节

THP1 细胞以 25、50、100 kcells/well 的密度接种,用 50 ng/mL PMA 和 1 µg/mL LPS 刺激 18 小时。取 16 µL 上清液转移至 384 孔低体积白色检测板,用人源 IL-1β 检测试剂盒分析。(标注:3assay-validation-hp-il1-62hil1b2pet-62hil1b2peg-62hil1b2peh-01.svg 为图表标识)

LPS 刺激 PBMC 分泌 IL-1β

PBMC 以 50、100、200 kcells/well 的密度接种,用 0.02–2 µg/mL 梯度浓度 LPS 刺激 18 小时。取 16 µL 上清液转移至 384 孔低体积白色检测板,用人源 IL-1β 检测试剂盒分析。(标注:4assay-validation-hp-il1-62hil1b2pet-62hil1b2peg-62hil1b2peh-02.svg 为图表标识)

地塞米松对 PBMC IL-1β 释放的影响

PBMC 以 50、100 kcells/well 的密度接种,用 0.2 µg/mL LPS 和 0.05–50 µg/mL 梯度浓度地塞米松共处理 18 小时。取 16 µL 上清液转移至 384 孔低体积白色检测板,用人源 IL-1β 检测试剂盒分析。(标注:5assay-validation-hp-il1-62hil1b2pet-62hil1b2peg-62hil1b2peh-03.svg 为图表标识)


产品规格

  • 应用领域:Protein Quantification(蛋白定量)
  • 品牌:HTRF
  • 检测方式:HTRF(均相时间分辨荧光)
  • 产品类别:Kit(试剂盒)
  • 样本体积:16 µL
  • 运输条件:干冰运输(Shipped in Dry Ice)
  • 靶标类别:Cytokines(细胞因子)
  • 靶标物种:Human(人)
  • 技术平台:TR-FRET(时间分辨荧光共振能量转移)
  • 单位规格:96 次检测(96 assay points)


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