核心结论
小鼠 CCL2(MCP-1)检测试剂盒是基于 HTRF 技术的均相定量工具,专为小鼠样本设计,灵敏度达 6 pg/mL、特异性强,可精准量化低浓度样本中的 CCL2,操作简便且支持高通量检测,适配代谢 / 糖尿病、NASH / 纤维化及肿瘤炎症相关研究,尤其适用于肥胖、神经炎症、动脉粥样硬化等疾病机制探索。
产品概述
CCL2(又称单核细胞趋化蛋白 1,MCP-1)是一种趋化因子,主要由单核细胞、巨噬细胞和树突状细胞分泌,可趋化单核细胞、嗜碱性粒细胞和 T 细胞募集至炎症部位。CCL2 与银屑病、动脉粥样硬化等疾病病理机制相关;在大脑中,神经元、星形胶质细胞和小胶质细胞可释放 CCL2,参与缺血或阿尔茨海默病相关的神经炎症反应;此外,脂肪细胞也可分泌 CCL2,干扰胰岛素信号传导,提示其在糖尿病相关炎症中发挥作用。血清样本检测需高灵敏度,AlphaLISA 技术可满足低水平分析物检测需求;检测时需遵循推荐方案,避免使用严重溶血样本。
工作原理
检测原理
样本(细胞上清液、血清等)直接加入检测板(384 孔低体积白色板或 Revvity 低体积 96 孔板),终体积 20 µL。HTRF 供体和受体标记的抗体已预混,单次加样即可完成反应,大幅简化操作流程。检测可适配至 1536 孔板格式,仅需按比例调整试剂体积。(标注:1cytokines-how-it-works-assay-principle-human-il13-62hil13peg-62hil13peh.svg 为原文引用图表标识,实际应为 “细胞因子 - 小鼠 CCL2 检测原理”)
数据分析
推荐使用 4 参数逻辑(4PL)曲线拟合标准曲线,能在宽浓度范围内准确量化样本,适配趋化因子等生物分子检测场景。Revvity 与Myassays.com合作提供数据分析支持,可通过对应链接获取免费在线 CCL2 分析软件,如需了解 HTRF 数据处理及 4PL 1/y² 拟合相关内容,可参考对应资料。
检测详情
技术规格
- 样本量:16 µL
- 最终检测体积:20 µL
- 试剂盒组分:冻干标准品、冷冻检测抗体、缓冲液及实验方案
- 检测限(LOD)(稀释液中):6 pg/mL
- 定量限(LOQ)(稀释液中):13 pg/mL
- 检测范围:13–1800 pg/mL
- 出结果时间:室温过夜(ON at RT)
- 校准情况:无可用校准标准(NA)
- 适用物种:仅小鼠(Mouse only)
分析性能
批内精密度(n=24)
- 每个样本检测 24 次,计算浓度变异系数(% CV)
- 样本 1:CCL2 均值 173 pg/mL,变异系数(CV)5%
- 样本 2:CCL2 均值 561 pg/mL,变异系数(CV)2%
- 样本 3:CCL2 均值 1594 pg/mL,变异系数(CV)2%
- 平均 CV:3%,体现优异的实验重复性
批间精密度(n=4)
- 每个样本在 4 个独立实验中检测,计算浓度变异系数(% CV)
- 样本 1:CCL2 含量 72 pg/mL,delta 比值均值 722,变异系数(CV)10%
- 样本 2:CCL2 含量 263 pg/mL,delta 比值均值 3102,变异系数(CV)11%
- 样本 3:CCL2 含量 960 pg/mL,delta 比值均值 12960,变异系数(CV)16%
- 平均 CV:12%,确保不同实验批次间的结果稳定性
检测验证
IL-1β 和 TNFα 刺激 3T3-L1 细胞分泌 CCL2
- 实验流程:3T3-L1 细胞以 3×10⁴个 / 孔接种到 12 孔板(1 mL 培养基 / 孔),培养至汇合后分化为脂肪细胞(约 7×10⁵个 / 孔);用 10 ng/mL 的 IL-1β 和 TNFα 联合刺激分化后的脂肪细胞 24 小时;收集上清液并稀释 100 倍,取 16 µL 稀释后的上清液转移至 384 孔低体积白色检测板,用小鼠 CCL2 检测试剂盒进行分析。
- 样本来源:法国尼斯 Inserm U1065 肥胖细胞与分子病理生理学研究团队(J.F. Tanti 团队)
(标注:10assay-validation-mouse-ccl2-1.svg 为图表标识,对应 “3T3-L1 细胞 CCL2 分泌验证”)
产品规格
- 应用领域:Protein Quantification(蛋白定量)
- 品牌:HTRF
- 检测方式:HTRF(均相时间分辨荧光)
- 产品类别:Kit(试剂盒)
- 样本体积:16 µL
- 运输条件:干冰运输(Shipped in Dry Ice)
- 靶标类别:Cytokines(细胞因子)
- 靶标物种:Mouse(小鼠)
- 技术平台:TR-FRET(时间分辨荧光共振能量转移)
- 治疗领域:Metabolism/Diabetes(代谢 / 糖尿病)、NASH/Fibrosis(非酒精性脂肪性肝炎 / 纤维化)、Oncology & Inflammation(肿瘤学与炎症)
- 单位规格:100,000 次检测(100,000 assay points)