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t;SF Pro Icons", "PingFang SC", "Hiragino Sans GB", "Microsoft YaHei", "Helvetica Neue", Helvetica, Arial, sans-serif; text-wrap-mode: wrap; background-color: rgb(255, 255, 255); color: var(--md-box-samantha-normal-text-color) !important;">human-total-cdk7-detection-kit(人总 CDK7 检测试剂盒)

HTRF 总 CDK7 检测与蛋白质印迹法的比较

将 HeLa 细胞在 T175 培养瓶中的完全培养基中于 37°C、5% CO₂条件下培养。孵育 48 小时后,用 3mL 补充的 1 号裂解缓冲液(1X)在室温下轻轻振荡 30 分钟以裂解细胞。


使用补充的裂解缓冲液对细胞裂解物进行系列稀释,将 16µL 每种稀释液转移至小体积白色微孔板中,然后加入 4µL HTRF 总 CDK7 检测试剂。使用等量的裂解物对 HTRF 检测与蛋白质印迹法进行平行比较。


使用 HTRF 总 CDK7 检测时,1250 个细胞 / 孔就足以检测到显著信号,而使用带有 ECL 检测的蛋白质印迹法则需要 5000 个细胞。因此,在这些条件下,HTRF 总 CDK7 检测的灵敏度是蛋白质印迹技术的 4 倍。


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简化通路

CDK7 在细胞分裂周期中的作用

CDK 传统上分为两个亚家族成员:协调细胞周期进程的 CDK(CDK1、CDK2、CDK4 和 CDK6)和转录 CDK(CDK7、CDK8、CDK9、CDK12 和 CDK13)。


CDK7(细胞周期蛋白依赖性激酶 7)既是 CDK 激活激酶(CAK),可磷酸化细胞周期 CDK(CDK1、CDK2、CDK4 和 CDK6),也是通用转录因子 TFIIH 的组成部分,通过磷酸化 RNA 聚合酶 II 的 C 末端结构域(CTD)来调节转录起始。


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