HTRF PAB ANTI MOUSE IGG-TB - 1K PTS Eu荧光标记的磷酸化IgG测量试剂-1,000测试

产品概述

该产品的核心活性物质是从兔抗小鼠免疫血清中提取免疫球蛋白 G（IgG），经免疫纯化工艺处理后，标记铽（Tb）元素构成的铽穴状化合物，形成高特异性、高灵敏度检测试剂 —— 多克隆抗体抗小鼠 IgG - 铽穴状化合物（PAb Anti Mouse IgG-Tb Cryptate）。其核心用途是精准检测未标记的小鼠特异性抗体与靶分子，或免疫球蛋白融合蛋白之间的结合反应，为小鼠源分子相互作用研究提供适配小规模实验的可靠工具。依托 HTRF 技术，该试剂适配生化与细胞两种实验场景，应用范围广泛，可用于研究蛋白 / 蛋白、蛋白 / 多肽、蛋白 / DNA、蛋白 / RNA、蛋白 / 碳水化合物、蛋白 / 小分子及受体 / 配体等多种分子间的相互作用。借助技术核心优势，它能检测皮摩尔（picomolar）到低毫摩尔（low millimolar）范围内的亲和力常数，适配不同强度的分子相互作用检测，适合小规模基础实验、预实验验证、初步药物研发筛选等场景。

工作原理

检测原理

在 HTRF 相互作用检测体系中，参与反应的两种分子需分别通过直接或间接方式标记供体荧光团和受体荧光团，检测产生的信号强度与二者结合程度呈正相关。典型应用场景中，本试剂可与带小鼠 Fc 融合标签的分子 A 特异性结合，而分子 B * 会与标记 HTRF 受体的特异性抗体结合。若分子 B 经过生物素化、带标签、Fc 融合等修饰，可选用抗标签抗体、抗种属抗体、蛋白 A、链霉亲和素等对应的 HTRF 受体标记试剂完成检测，适配多样实验设计需求。（标注：HTRF PAb Anti Mouse IgG-Tb cryptate 1.svg 对应 “抗小鼠 IgG - 铽穴状化合物 HTRF 检测原理示意图”）

检测流程

以下是终反应体积为 20μL 的标准流程，适用于检测带小鼠 Fc 融合标签的分子 A 与非标记分子 B * 的相互作用，具体步骤如下：

1. 向检测孔中加入两种待检测的相互作用分子，总体积 10μL，按实验要求完成孵育；
2. 依次加入 5μL 多克隆抗体抗小鼠 IgG - 铽穴状化合物和 5μL 受体标记的抗分子 B 抗体，孵育结束后，用适配 HTRF 技术的检测仪读取信号即可。

若分子 B 存在生物素化、带标签、Fc 融合修饰或直接标记等情况，替换为对应的 HTRF 受体标记试剂进行检测即可。（标注：HTRF PAb Anti Mouse IgG-Tb cryptate 2.svg 对应 “抗小鼠 IgG - 铽穴状化合物 HTRF 检测流程示意图”）

检测详情

检测次数与活性成分的关联

每孔中偶联物的平均用量能反映生物材料的总体含量，实验中优先参考活性成分含量比总偶联物质量更具科学性。对于铽穴状化合物（Cryptate）和 d2 标记的偶联物，由于标记物分子量极小可忽略不计，总偶联物量与活性成分量完全一致；而 XL665 标记偶联物的总偶联物量会随 XL665 与抗体的摩尔偶联比变化，但 Revvity 提供的该试剂活性成分量固定不变，且严格匹配 1000 次检测的规格，保障小规模实验结果的稳定性与重复性。（标注：HTRF PAb Anti Mouse IgG-Tb cryptate 3.svg 对应 “检测次数与活性成分关联说明图”）

推荐用量标准

1. 铽穴状化合物偶联物（供体）：用量需严格把控，过量使用易造成检测仪信号饱和、背景信号过高，影响检测准确性。多数实验场景下，1–5nM 的浓度最为合适，搭配不同的 HTRF 兼容检测仪，在 620nm 波长下可产生 20,000–80,000cps（计数 / 秒）的稳定信号。
2. XL665 偶联物（受体）：浓度需尽量与检测靶点浓度匹配，才能让更多生物分子被 XL665 受体标记，保证结合效率。例如，当检测靶点浓度为 20nM 时，抗标签 - XL665 偶联物浓度需达到等摩尔及以上水平，以此提升检测信号的特异性与灵敏度。

产品规格

• 应用领域：蛋白 - 蛋白相互作用检测（Protein-Protein Interaction）
• 品牌：HTRF
• 检测方式：HTRF（均相时间分辨荧光）
• 产品类别：荧光试剂（Fluorescent Reagent）
• 运输条件：干冰运输（Shipped in Dry Ice）
• 靶标类别：生物制品（Biologics）
• 靶标物种：小鼠（Mouse）
• 技术平台：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）
• 适用治疗领域：心血管疾病、感染性疾病、炎症、代谢 / 糖尿病、非酒精性脂肪性肝炎 / 纤维化、神经科学、肿瘤学与炎症、罕见病
• 单位规格：1,000 次检测（1,000 assay points）