白细胞介素 - 22(IL-22)是一种 2 型细胞因子(属于 IL-10 家族成员),在针对胞外病原体的先天性保护性免疫中发挥关键作用。它可诱导促炎反应,促进抗菌肽的产生,同时也参与上皮细胞的伤口愈合与再生过程。人源 IL-22 由炎症部位的 Th17 型 CD4 + 细胞、活化 T 细胞、Th1 细胞及自然杀伤细胞(NK 细胞)产生。分泌后,IL-22 主要作用于非造血细胞,并与局限于组织驻留细胞(成纤维细胞、上皮细胞)表面的 IL-22 受体(IL22R)结合。其下游信号通路涉及 Jak1 和 Tyk2 的磷酸化,进而激活 STAT3 信号分子。
Cisbio 公司的人源 IL-22 检测试剂盒是一种均相 “加样即读” 型检测工具,可用于定量细胞上清液中的 IL-22 分泌水平,为酶联免疫吸附试验(ELISA)提供了一种快速、高效的替代方案。
血清样本检测通常需要更高的灵敏度。在某些情况下,扩增发光均相免疫分析(AlphaLISA)检测法的灵敏度足以检测出血清或血浆中低水平的分析物。检测时,需始终遵循推荐实验方案,并避免使用严重溶血的样本。
将细胞上清液、样本或标准品直接加入检测板中,使用均相时间分辨荧光(HTRF®)试剂进行检测(检测板可选用 384 孔小体积白色板或瑞孚迪(Revvity)96 孔小体积板,反应体积为 20 微升)。偶联 HTRF 供体荧光团与受体荧光团的抗体已预先混合,可通过单次加样步骤加入,进一步简化检测流程。该检测可轻松调整至 1536 孔板检测格式,只需按比例调整各试剂的添加体积即可。
(标注:1cytokines-how-it-works-assay-principle-human-il13-62hil13peg-62hil13peh.svg,即 “人源白细胞介素 - 22 检测原理示意图”)
四参数逻辑斯蒂(4PL)曲线是拟合 ELISA 标准曲线的常用方法。与线性分析相比,这种回归方法能在更宽的浓度范围内对未知样本进行准确定量,非常适合细胞因子释放等生物系统的分析。
如需充分了解如何处理 HTRF 数据以及四参数逻辑斯蒂 1/y² 拟合方法,可参考相关资料。
瑞孚迪(Revvity)还与Myassays.com合作,为数据分析提供支持。您可访问一款免费在线软件,用于进行 IL-22 检测数据分析。