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HTRF (H/M) TDP43 P-S409 KIT - 500 PTS

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概述

TAR DNA 结合蛋白 43（TDP-43）是一种参与 RNA 相关代谢的核酸结合蛋白。TDP-43 聚集体已被确认为肌萎缩侧索硬化症和额颞叶痴呆的标志性物质，更广泛地说，它也是多种神经退行性疾病（即 TDP-43 蛋白病）的标志。在病理状态下（如基因突变或调控异常），TDP-43 会在大脑和脊髓神经元的细胞质中形成不溶性包涵体。本 TDP-43 磷酸化检测可对细胞裂解液中的人源磷酸化 TDP-43 进行检测。

作用原理

TDP-43 磷酸化检测原理

TDP-43 磷酸化检测可对 Ser409/410 位点磷酸化的 TDP-43 进行定量分析。与蛋白质印迹法不同，该检测为全板基操作，无需使用凝胶、进行电泳或转膜。该检测采用两种抗体：一种标记供体荧光团，另一种标记受体荧光团。其中，第一种抗体经筛选可特异性结合蛋白质上的磷酸化基序，第二种抗体则可识别蛋白质本身（与蛋白质是否磷酸化无关）。当蛋白质发生磷酸化时，会形成由两种标记抗体共同参与的免疫复合物，使供体荧光团与受体荧光团近距离接触，进而产生荧光共振能量转移信号。该信号的强度与样本中磷酸化蛋白质的浓度呈直接正相关，且可在免洗涤检测模式下评估蛋白质的磷酸化状态。

（标注：Assay principle phospho tdp，即 “TDP-43 磷酸化检测原理示意图”）

TDP-43 磷酸化双板检测方案

双板检测方案的操作流程如下：先在 96 孔板中培养细胞，随后对细胞进行裂解；将裂解液转移至 384 孔小体积检测板中，再加入 TDP-43 磷酸化 HTRF 检测试剂。该方案可同时监测细胞的活力与汇合度。