品牌: Revvity
该产品是一款针对谷胱甘肽 S - 转移酶(GST)制备的 IgG2a 型单克隆抗体,经铽(Tb)标记形成抗 GST-Tb cryptate 试剂。其具备出色的特异性,可与多种表达载体所产生的 GST 标签融合蛋白发生特异性反应,同时适配生化与细胞两种实验体系,能广泛助力蛋白 / 蛋白、蛋白 / 多肽、蛋白 / DNA、蛋白 / RNA、蛋白 / 碳水化合物、蛋白 / 小分子、受体 / 配体等多种分子间相互作用的研究。借助 HTRF 技术,该试剂检测范围覆盖广,可检测解离常数从皮摩尔到低毫摩尔级别的各类亲和力相互作用,适配不同强度分子作用的研究场景。
在 HTRF 相互作用检测体系里,参与作用的两个分子伴侣需分别通过直接或间接方式标记信号供体和受体,且检测信号的强度和两个分子的结合程度呈正相关。具体应用中,抗 GST-Tb cryptate 会特异性结合带 GST 标记的分子伴侣 A,而分子伴侣 B 则与标记了 HTRF 受体的特异性抗体结合。若分子伴侣 B 经过生物素化、标签标记或 Fc 融合修饰,可选用抗标签、抗种属、蛋白 A、链霉亲和素等对应的 HTRF 受体标记试剂完成检测。(标注:HTRF MAb Anti GST-Tb cryptate 1.svg,对应 “抗 GST-Tb cryptate 检测原理示意图”)
以 20 微升最终反应体积检测 GST 标记的分子伴侣 A 与非标记分子伴侣 B 的相互作用为例,流程如下:先加入 10 微升两种分子伴侣的混合液并完成孵育;接着加入 5 微升抗 GST-Tb cryptate 试剂和 5 微升标记受体的抗分子伴侣 B 抗体;再次孵育后读取荧光信号即可。若分子伴侣 B 为生物素化、标签标记、Fc 融合修饰或直接标记类型,替换为对应的受体标记 HTRF 试剂就能完成检测适配。(标注:HTRF MAb Anti GST-Tb cryptate 2.svg,对应 “抗 GST-Tb cryptate 检测流程示意图”)
每孔中偶联物的平均含量可反映体系内生物材料的总体含量,实验中优先参考活性部分含量比参考偶联物总含量更科学。对于铽穴状化合物和 d2 类偶联物,因标记物分子量极小可忽略不计,偶联物总含量和活性部分含量完全一致;而 XL665 标记的偶联物总含量会随其最终摩尔比变化而波动,但 Revvity 提供的该试剂活性部分含量始终恒定,且含量与订购的检测次数严格对应。(标注:HTRF MAb Anti GST-Tb cryptate 3.svg,对应 “活性部分含量与检测次数关联说明图”)