品牌: Revvity
本试剂可应用于生化和细胞实验体系,研究多种相互作用类型,包括:蛋白 - 蛋白、蛋白 - 多肽、蛋白 - DNA、蛋白 - RNA、蛋白 - 碳水化合物、蛋白 - 小分子、受体 - 配体相互作用。
均相时间分辨荧光技术(HTRF)可检测的亲和常数范围极广,从皮摩尔级至低毫摩尔级均可覆盖。
相较于其他技术,HTRF 检测法具备多项优势:
均相 “加样即读” 实验体系
无需洗涤步骤
背景信号低
可便捷地从 96 孔 / 384 孔微孔板微型化至高密度实验体系,如 384 孔低体积板、1536 孔板
信号稳定,为检测时间选择和实验规模调整提供灵活性
在 HTRF 相互作用检测中,一相互作用物通过直接 / 间接方式标记供体,另一相互作用物通过直接 / 间接方式标记受体。信号强度与两种相互作用物的结合程度成正比。本产品的检测示例为:抗 MBP-d2 单克隆抗体与带 MBP 标签的相互作用物 A 结合,同时标记有 HTRF 供体的特异性抗体与相互作用物 B 结合。* 相互作用物 B 也可进行生物素化、加标签、Fc 融合改造,此类情况下可使用相应的标记供体的 HTRF 试剂(抗标签抗体、抗种属抗体、蛋白 A、链霉亲和素)进行检测。
右侧示例为终体积 20 微升的检测操作流程,用于检测带 MBP 标签的相互作用物 A 与无标签的相互作用物 B 之间的相互作用。加样两种相互作用物(10 微升)并孵育,加入抗 MBP-d2 单克隆抗体(5 微升)和标记供体的抗相互作用物 B 抗体(5 微升),孵育后完成检测。* 相互作用物 B 也可进行生物素化、加标签、Fc 融合改造或直接标记,此类情况下可使用相应的标记供体的 HTRF 试剂(抗标签抗体、抗种属抗体、蛋白 A、链霉亲和素)进行检测。
本试剂按检测次数销售(按 20 微升反应体系计)。偶联 XL665 或 d2 的抗体以每孔 20 纳克抗体的标准提供,同时还会标注每瓶试剂中的活性成分含量(以及每瓶中的示踪物数量,详见产品说明书)。活性成分指偶联物的活性部分(如抗体)。