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当前位置:首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > HTRF MAB ANTI MBP-D2 - 5K PTS MBP d2测量试剂-5,000测试

概述


抗麦芽糖结合蛋白 - d2 单克隆抗体(MAb Anti MBP-d2)为免疫球蛋白 G1 型抗体,以经 d2 标记的麦芽糖结合蛋白(MBP)融合蛋白纯化重组体为免疫原制备而成。该抗体可识别天然形式及变性还原形式的纯化 MBP 或 MBP 融合蛋白。


本试剂可应用于生化和细胞实验体系,研究多种相互作用类型,包括:蛋白 - 蛋白、蛋白 - 多肽、蛋白 - DNA、蛋白 - RNA、蛋白 - 碳水化合物、蛋白 - 小分子、受体 - 配体相互作用。


均相时间分辨荧光技术(HTRF)可检测的亲和常数范围极广,从皮摩尔级至低毫摩尔级均可覆盖。


相较于其他技术,HTRF 检测法具备多项优势:

  • 均相 “加样即读” 实验体系

  • 无需洗涤步骤

  • 背景信号低

  • 可便捷地从 96 孔 / 384 孔微孔板微型化至高密度实验体系,如 384 孔低体积板、1536 孔板

  • 信号稳定,为检测时间选择和实验规模调整提供灵活性


工作原理

检测原理

在 HTRF 相互作用检测中,一相互作用物通过直接 / 间接方式标记供体,另一相互作用物通过直接 / 间接方式标记受体。信号强度与两种相互作用物的结合程度成正比。本产品的检测示例为:抗 MBP-d2 单克隆抗体与带 MBP 标签的相互作用物 A 结合,同时标记有 HTRF 供体的特异性抗体与相互作用物 B 结合。* 相互作用物 B 也可进行生物素化、加标签、Fc 融合改造,此类情况下可使用相应的标记供体的 HTRF 试剂(抗标签抗体、抗种属抗体、蛋白 A、链霉亲和素)进行检测。


检测操作流程

右侧示例为终体积 20 微升的检测操作流程,用于检测带 MBP 标签的相互作用物 A 与无标签的相互作用物 B 之间的相互作用。加样两种相互作用物(10 微升)并孵育,加入抗 MBP-d2 单克隆抗体(5 微升)和标记供体的抗相互作用物 B 抗体(5 微升),孵育后完成检测。* 相互作用物 B 也可进行生物素化、加标签、Fc 融合改造或直接标记,此类情况下可使用相应的标记供体的 HTRF 试剂(抗标签抗体、抗种属抗体、蛋白 A、链霉亲和素)进行检测。


检测详情

可针对特定应用需求构建专属的 HTRF 相互作用检测体系

本试剂按检测次数销售(按 20 微升反应体系计)。偶联 XL665 或 d2 的抗体以每孔 20 纳克抗体的标准提供,同时还会标注每瓶试剂中的活性成分含量(以及每瓶中的示踪物数量,详见产品说明书)。活性成分指偶联物的活性部分(如抗体)。


检测次数与活性成分含量的关联

每孔偶联物的平均用量反映了生物原料的总体含量,实际应用中通常优先参考活性成分含量,而非偶联物总含量。对于穴状化合物(Cryptate)和 d2 偶联物,由于标记物的分子量可忽略不计,偶联物总含量与活性成分含量相等;而 XL665 标记物的偶联物总含量会随 XL665 偶联物的最终摩尔比发生变化,瑞孚迪(Revvity)提供的 XL665 标记试剂,其活性成分含量恒定,且与订购的检测次数相对应。


产品规格


其他规格信息

  • 应用领域:蛋白 - 蛋白相互作用研究
  • 品牌:HTRF
  • 检测方式:均相时间分辨荧光技术(HTRF)
  • 产品类别:荧光试剂
  • 运输条件:干冰运输
  • 检测类型:结合实验
  • 核心技术:时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)
  • 适用治疗领域:心血管疾病、感染性疾病、炎症性疾病、代谢 / 糖尿病、非酒精性脂肪性肝炎 / 肝纤维化、神经科学、肿瘤与炎症、罕见病
  • 产品规格:5000 次检测量
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