概述

人源 IL12/IL12Rβ1 检测体系对 IL12/IL12Rβ1 具有高度特异性，因此特别适用于抗 p40 亚基抗体的发现与表征。

工作原理

检测原理

HTRF IL12/IL12Rβ1 结合试剂盒用于检测 IL12 与 IL12Rβ1 蛋白之间的相互作用。在无干预条件下，IL12 与 IL12Rβ1 结合，两种检测抗体分别与各自标记的靶蛋白结合，从而产生 HTRF 信号。当存在阻断化合物或人源阻断抗体时，IL12 与 IL12Rβ1 的相互作用被破坏，HTRF 信号随之降低。

检测流程

人源 IL12/IL12Rβ1 结合试剂盒可在 96 孔或 384 孔低体积白色板中进行检测，终体积为 20 微升。操作流程如下：将样品或标准品直接加入检测板，随后加入带标签 1 的 IL12 蛋白和带标签 2 的 IL12Rβ1 蛋白，再加入 HTRF 检测试剂：铕隐穴染料标记的抗标签 1 抗体，以及 XL665 标记的抗标签 2 试剂。带有 HTRF 荧光标记的试剂可预先混合后一次性加入，无需洗涤步骤。该检测流程可通过按比例调整各组分的加入体积进一步微型化或扩大化。

检测验证

IL12/IL12Rβ1 阻断剂的抑制效果

实验测试了三种针对 IL12/IL23 p40 亚基的抗体、两种抗 p19（IL23）抗体，以及抗 IL6 抗体托珠单抗和抗 TNFα 抗体阿达木单抗的抑制作用。乌司奴单抗、MT3279H 和 MT86/221 可阻断 IL12 与 IL12Rβ1 的相互作用，其半数抑制浓度分别为 1.6、0.6 和 1.4 纳摩尔。两种抗 p19 抗体（古塞库单抗和 MT155）、托珠单抗及阿达木单抗均未表现出抑制作用。

IL12/IL12Rβ1 标准品的抑制效果

在试剂盒标准检测条件下绘制标准品的剂量反应曲线，得到半数抑制浓度为 0.8±0.3 纳摩尔。

产品规格

其他参数

应用：蛋白质 - 蛋白质相互作用

品牌：HTRF

检测方式：HTRF

产品类别：试剂盒

样本体积：2 微升

运输条件：干冰运输

靶标类型：结合检测

靶标物种：人

技术平台：时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）

治疗领域：炎症

规格：500 次检测点