概述

人源 IL12/IL12Rβ1 结合检测试剂盒对 IL12/IL12Rβ1 具有高度特异性，因此特别适用于抗 p40 抗体的筛选与表征。

工作原理

检测原理

HTRF IL12/IL12Rβ1 结合试剂盒用于定量检测 IL12 与 IL12Rβ1 蛋白之间的相互作用。在未加处理的情况下，IL12 与 IL12Rβ1 结合，两种检测抗体分别结合各自标记的蛋白，从而产生 HTRF 信号。当加入受试化合物或人源阻断性抗体时，IL12 与 IL12Rβ1 的相互作用被破坏，HTRF 信号随之降低。

实验流程

人源 IL12/IL12Rβ1 结合试剂盒可在 96 孔或 384 孔低体积白色微孔板中进行检测（终体积 20 微升）。按如下步骤操作：将样品或标准品直接加入检测板，随后加入 Tag1 标记的 IL12 蛋白与 Tag2 标记的 IL12Rβ1 蛋白，再加入 HTRF 检测试剂 —— 铕穴状化合物标记的抗 Tag1 抗体、XL665 标记的抗 Tag2 试剂。带有 HTRF 荧光标记的试剂可预先混合后一次性加样。全程无需洗涤。该流程可通过按比例调整各试剂加样体积，进一步实现微型化或扩大化检测。

检测验证

IL12/IL12Rβ1 阻断剂的抑制效果

实验测试了三种针对 IL12/IL23 p40 亚基的抗体、两种抗 p19（IL23）抗体，以及抗 IL6 抗体托珠单抗、抗 TNFα 抗体阿达木单抗的抑制作用。优特克单抗、MT3279H 与 MT86/221 可阻断 IL12/IL12Rβ1 的相互作用，其半数抑制浓度（IC50）分别为 1.6、0.6 和 1.4 纳摩尔。两种抗 p19 抗体（古塞库单抗、MT155）、托珠单抗与阿达木单抗均未表现出抑制作用。

IL12/IL12Rβ1 标准品的抑制效果

在试剂盒标准检测条件下，标准品的剂量反应曲线显示半数抑制浓度（IC50）为 0.8±0.3 纳摩尔。

产品规格

其他参数

应用方向：蛋白质 - 蛋白质相互作用研究

品牌：HTRF

检测方式：HTRF

产品类别：试剂盒

样本体积：2 微升

运输条件：干冰运输

靶标类型：结合检测试剂盒

靶标物种：人源

技术平台：时间分辨荧光共振能量转移（TR‑FRET）

治疗领域：炎症

规格：10000 次检测量