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HTRF KRAS WT GTP BIND. KIT - 10K PTS

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品牌： Revvity

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概述

本产品可快速、简便地鉴定新型KRAS 野生型 / GTP竞争性抑制剂。KRAS 是一种小分子 GTP 酶，参与多种生物学过程，包括细胞增殖、细胞存活和细胞代谢。该原癌基因在多种肿瘤亚型中均存在高频突变，可引发细胞异常增殖和细胞代谢改变，进而参与肿瘤细胞的瓦博格效应。与大多数小分子 GTP 酶类似，KRAS 结合 GDP 时处于失活状态，结合 GTP 则转变为激活状态。KRAS G12C 是肿瘤中最常见的突变体之一，可导致 KRAS 持续处于激活状态。

因此，筛选新型 KRAS/GTP 竞争性抑制剂，通过降低 KRAS 活性及相关通路活性，是调控肿瘤生长相关生物学过程的有效策略。

工作原理

检测原理

HTRF KRAS GTP 结合检测采用竞争性检测模式，以 GTP‑Red 试剂作为 KRAS 野生型配体，使用带 6His 标签的重组人源 KRAS 野生型蛋白以及铕穴状化合物标记的抗 6His 抗体。待测化合物与 GTP‑Red 试剂发生竞争结合，从而阻断荧光共振能量转移（FRET）的发生。

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检测流程

人源 KRAS 野生型结合实验可在 96 孔或 384 孔低体积白色微孔板中进行（终体系 20 µL）。操作如下：将样品或标准品直接加入检测板，随后加入带 His 标签的人源 KRAS 野生型蛋白，再加入 HTRF 检测试剂 —— 铕穴状化合物标记的抗 6His 抗体与 GTP‑Red 试剂。带有 HTRF 荧光基团的试剂可预先混合后一次性加样。实验无需洗涤步骤。通过按比例调整各试剂加样体积，可进一步实现实验体系的微型化或扩大化。

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