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HTRF MDM2 BINDING KIT - 500 PTS MDM2 蛋白结合试剂盒-500测试

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概述

一种快速简便的 MDM2 蛋白新型结合分子鉴定方法。

MDM2，即鼠双微体蛋白 2，参与多种生物学过程，与 DNA 修复、细胞周期停滞、细胞凋亡以及多种疾病的发生密切相关。MDM2 是应用最广泛的 E3 泛素连接酶之一，可被双功能蛋白降解靶向嵌合体（PROTACs）招募，介导靶蛋白的泛素化及其后续的蛋白酶体降解。MDM2 可与多种蛋白质相互作用形成功能性 E3 泛素连接酶复合物，在复合物中作为底物受体，介导多种蛋白的降解。

因此，发现新型靶向 MDM2 的 PROTAC 配体，能够提升对癌症、神经退行性疾病、代谢紊乱等疾病相关靶蛋白的选择性蛋白酶体降解。

工作原理

检测原理

HTRF MDM2 结合试剂盒采用竞争性检测模式，使用 MI-1061 红色配体作为 MDM2 配体、带 GST 标签的重组人源 MDM2 蛋白，以及铕穴状化合物标记的抗 GST 抗体。可结合 MDM2 的化合物会与 HTRF MI-1061 红色配体产生竞争，从而阻止荧光共振能量转移（FRET）的发生。

检测流程

MDM2 结合实验可在 96 孔或 384 孔低体积白色微孔板中进行（终体系 20 微升）。操作如下：将样品或标准品直接加入检测板，随后加入带 GST 标签的 MDM2 蛋白，再加入 HTRF 检测试剂，即铕穴状化合物标记的抗 GST 抗体与红色 HTRF 受体标记的 MI-1061 配体。带有 HTRF 荧光基团的试剂可预先混合后一次性加样。实验无需洗涤步骤。通过按比例调整各试剂加样体积，可进一步实现实验体系的微型化或扩大化。