概述

• 均相 “加样即读数” 操作模式
• 无需洗涤步骤
• 背景信号低
• 易于实现微型化，可从 96 孔或 384 孔微孔板直接适配至高密度检测体系，如 384 孔低体积板和 1536 孔板
• 信号稳定，检测时间与实验规模灵活可调

检测原理

HTRF H232 STING 结合检测采用竞争性检测模式，实验试剂包括 d2 标记的 H232 STING 配体、带 6× 组氨酸标签的人源 H232 STING 蛋白，以及铽隐穴染料标记的抗 6× 组氨酸抗体。待测化合物会与 d2 标记的 H232 STING 配体产生竞争结合，从而抑制荧光共振能量转移（FRET）的发生。

检测流程

人源 H232 STING 结合实验可在 96 孔或 384 孔低体积白色微孔板中开展（终反应体系 20 微升）。按如下步骤操作：将样品或标准品直接加入检测板，随后加入带组氨酸标签的人源 H232 STING 蛋白，再添加 HTRF 检测试剂，即铽隐穴染料标记的抗 6× 组氨酸抗体与 d2 标记的 H232 STING 配体。带有 HTRF 荧光基团的试剂可预先混合后一次性加样。全程无需洗涤。该流程可通过按比例调整各试剂加样体积，进一步实现微型化或规模化检测。

实验验证

化合物筛选

DMXAA 作为非特异性化合物，同时也是经典的小鼠 STING 结合剂，在本实验中无明显作用，证实该试剂盒具有人源特异性。

简化信号通路

STING 信号通路简介

干扰素基因刺激蛋白（STING）是定位于内质网的胞质同源二聚体蛋白，在先天免疫中发挥核心作用。当病原体感染或细胞凋亡过程中线粒体崩解时，游离的双链 DNA 会结合并激活 DNA 感受器 —— 环鸟苷酸 - 腺苷酸合成酶（cGAS）。活化的 cGAS 催化生成环二核苷酸 2’-3’cGAMP，后者进而与 STING 蛋白结合。磷酸化的 STING 随后与 TANK 结合激酶 1（TBK1）相互作用，招募并激活干扰素调节因子 3（IRF3）二聚体。IRF3 二聚体转入细胞核，启动干扰素 α/β 编码基因的转录。此外，STING 通路还调控核因子 κB（NF‑κB）依赖的炎症因子表达。作为负反馈调控，DNA 激活的 cGAS‑STING‑TBK1 通路会通过 p62/SQSTM1 介导的自噬触发 STING 蛋白降解，从而终止干扰素 β 的产生。

产品规格

其他参数

• 应用方向：蛋白 - 蛋白相互作用研究
• 品牌：HTRF
• 细胞或信号通路：炎症小体 / 模式识别受体（PRRs）
• 检测方式：HTRF
• 产品类别：检测试剂盒
• 样品体积：5 微升
• 运输条件：干冰运输
• 检测靶点：H232 STING
• 靶点类型：结合实验
• 靶点物种：人源
• 技术原理：时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）
• 适用治疗领域：感染性疾病、肿瘤与炎症
• 规格：500 次检测量