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当前位置:首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > HTRF SYK TOTAL KIT - CTRL LYSATE

概述


本细胞裂解液可用于验证总 SYK 检测(Total SYK Assay)。作为阳性对照,它能帮助研究人员在开展该检测时排除各类检测相关问题,确保实验结果可靠。该裂解液的制备流程如下:采用 3 号裂解缓冲液(货号 64KL3FDF),对经抗 IgM 抗体刺激的 Ramos 细胞(人 B 细胞淋巴瘤细胞)进行裂解获得;其中,抗 IgM 抗体的刺激条件为 20 微克 / 毫升(µg/mL)浓度、持续 10 分钟,以确保 SYK 蛋白充分表达,满足阳性对照的功能需求。


规格参数


  • 应用领域:细胞信号传导
  • 品牌:HTRF
  • 检测方式:HTRF(均相时间分辨荧光)
  • 分子修饰类型:总蛋白(Total,涵盖 SYK 的磷酸化与非磷酸化状态)
  • 产品类别:对照裂解液(Control Lysate)
  • 运输条件:干冰运输
  • 靶点类别:磷酸化蛋白
  • 靶点物种:人(Human)
  • 技术平台:TR-FRET(时间分辨荧光共振能量转移)
  • 治疗领域:神经科学、肿瘤学与炎症
  • 单位规格:1 支 / 瓶


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ot;PingFang SC", "Hiragino Sans GB", "Microsoft YaHei", "Helvetica Neue", Helvetica, Arial, sans-serif; text-wrap-mode: wrap; background-color: rgb(255, 255, 255); color: var(--md-box-samantha-normal-text-color) !important;">将 A549 细胞接种到 T175 培养瓶中,加入完全培养基,在 37°C、5% 二氧化碳条件下培养。孵育 48 小时后,用 500 微摩尔氯喹刺激细胞 5 小时,随后加入 3 毫升补充后的 3 号裂解缓冲液(1 倍浓度,1X),在室温(RT)下轻柔振荡裂解 30 分钟。


用补充后的裂解缓冲液对细胞裂解液进行系列稀释,取 12 微升各稀释度裂解液转移至小体积白色微孔板,先加入 2 微升均相时间分辨荧光磷酸化与总蛋白激活试剂 A、2 微升均相时间分辨荧光磷酸化与总蛋白激活试剂 B,再加入 4 微升总 Rab10 均相时间分辨荧光检测试剂。取等量裂解液,通过蛋白质印迹法与均相时间分辨荧光法进行平行对比检测。


结果显示:蛋白质印迹法与均相时间分辨荧光法的平行对比表明,至少在此实验条件下,总 Rab10 均相时间分辨荧光检测的灵敏度是蛋白质印迹法的 32 倍。


assay-validation-rab10-total-pharmaco-4(图示:总 Rab10 药物验证 4)


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