当前位置：首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > Phosphoproteins > HTRF ANDRO RECEPTOR KIT - 50K PTS

HTRF ANDRO RECEPTOR KIT - 50K PTS

分享给好友

rvty_ls_sds_64ANDRPEG_US rvty_ls_sds_64ANDRPEG_UK rvty_ls_sds_64ANDRPEG_SPA rvty_ls_sds_64ANDRPEG_ITA rvty_ls_sds_64ANDRPEG_ELL rvty_ls_sds_64ANDRPEG_DEU rvty_ls_sds_64ANDRPEG_FRA

收藏咨询

品牌： Revvity

产品详情
相关解决方案
相关资源
相关视频
相关问答

概述

HTRF 人雄激素受体检测可监测野生型雄激素受体（AR-WT）和雄激素受体剪接变体 7（AR-V7），用于检测各种细胞中内源性或过表达雄激素受体的表达情况。

雄激素受体是一种核受体，可被雄激素（如睾酮（T）和二氢睾酮（DHT））激活。

雄激素与雄激素受体的配体结合域结合，导致受体同源二聚化并转运至细胞核。这会激活下游基因表达和信号通路（如 PI3K/AKT 通路）的激活。雄激素受体诱导的基因表达会引发细胞分裂、增殖、分化、凋亡和血管生成。雄激素受体通路的失调可能导致致癌表型，且雄激素受体的激活或过表达与前列腺癌以及乳腺癌、胶质母细胞瘤等其他类型癌症密切相关。此外，雄激素受体变体在多种人类癌细胞系中表达。雄激素受体变体 7（AR-V7）是雄激素受体 mRNA 的剪接变体，会导致配体结合域截断，具有组成型活性，在人类癌细胞系中广泛表达。因此，雄激素受体已成为制药行业的重要药物靶点。开发靶向雄激素受体降解的 PROTAC 化合物是靶向雄激素受体阳性癌症的治疗策略之一。

工作原理

HTRF 人雄激素受体检测原理

HTRF 人雄激素受体检测可定量细胞裂解物中雄激素受体的表达水平。与蛋白质印迹法（Western Blot）不同，该检测完全基于微孔板进行，无需凝胶、电泳或转膜步骤。人雄激素受体检测使用两种标记抗体：一种偶联供体荧光团，另一种偶联受体荧光团。两种抗体均对该蛋白上的特定表位具有高度特异性。当细胞提取物中存在雄激素受体时，添加这些偶联物会使供体荧光团与受体荧光团靠近，从而产生荧光共振能量转移（FRET）信号。信号强度与样品中蛋白质的浓度直接成正比，且该检测采用无需洗涤的格式，为评估蛋白质表达提供了便利。

人雄激素受体双板检测方案

双板方案包括：先在 96 孔板中培养细胞，裂解后将裂解物转移至 384 孔小体积检测板，再加入人雄激素受体 HTRF 检测试剂。该方案能够监测细胞的活力和汇合度。

人雄激素受体单板检测方案

使用 HTRF 试剂检测人雄激素受体可在单个微孔板中完成，该板可用于细胞培养、刺激和裂解，无需洗涤步骤。这种为高通量筛选（HTS）设计的方案能够实现微型化，同时保持稳定的 HTRF 检测质量。

检测验证

通过 HTRF 和蛋白质印迹法监测细胞中人类雄激素受体的降解

对比了通过蛋白质印迹法和 HTRF 人雄激素受体试剂盒监测 ARCC-4 PROTAC 化合物对雄激素受体的剂量依赖性降解：将人前列腺癌细胞系 LNCaP 以 75,000 个细胞 / 孔的密度接种到 96 孔培养处理板中，在完全培养基中于 37°C、5% CO₂条件下过夜孵育；用浓度范围为 5nM 至 10,000nM 的 ARCC-4 PROTAC 化合物处理细胞 24 小时；处理后，用 50µL 补充裂解缓冲液 #3 在室温下轻轻振荡裂解细胞 30 分钟；对于人雄激素受体试剂盒的检测步骤，将 16µL 细胞裂解物转移至 384 孔小体积白色微孔板中，加入 4µL HTRF 人雄激素受体检测试剂；孵育 2 小时后记录 HTRF 信号。HTRF 人雄激素受体试剂盒测定出 ARCC-4 PROTAC 化合物在 LNCaP 细胞中降解人雄激素受体的 DC50（50% 靶蛋白被降解时的浓度）为 900nM。通过蛋白质印迹法评估了 ARCC-4 PROTAC 化合物对 LNCaP 细胞中表达的 AR-WT 和 AR-V7 两种形式的降解情况：结果表明，只有 AR-WT 会被 ARCC-4 PROTAC 化合物降解，这也解释了为何能同时检测两种形式的 HTRF 人雄激素受体试剂盒所监测到的降解是部分降解。ARCC-4 PROTAC 化合物在 LNCaP 细胞中降解人雄激素受体的 DC50 值，在 HTRF 人雄激素受体试剂盒和蛋白质印迹法中是一致的。

HTRF 人雄激素受体检测与蛋白质印迹法的比较

人乳腺癌细胞在 T175 培养瓶的完全培养基中于 37°C、5% CO₂条件下培养 48 小时；用 3mL 补充裂解缓冲液 #3 在室温下轻轻振荡裂解细胞 30 分钟；用补充裂解缓冲液对细胞裂解物进行系列稀释，将 16µL 各稀释液转移至小体积白色微孔板中，然后加入 4µL HTRF 人雄激素受体检测试剂；使用等量的裂解物进行 HTRF 与蛋白质印迹法的平行比较。使用 HTRF 人雄激素受体检测时，1,500 个细胞 / 孔就足以检测到显著信号，而使用蛋白质印迹法则需要 6,500 个细胞才能获得最小的化学发光信号。因此，在这些条件下，HTRF 人雄激素受体检测的灵敏度是蛋白质印迹法的 4.5 倍。

简化通路

雄激素受体信号通路

雄激素受体（AR）是一种核受体，可被雄激素（如睾酮（T）和二氢睾酮（DHT））激活。雄激素穿过细胞膜直接与雄激素受体结合，诱导雄激素受体同源二聚化并允许其转运至细胞核。然后，雄激素受体二聚体结合到雄激素应答元件（ARE）上，引发基因表达，进而导致细胞分裂、增殖、分化、凋亡和血管生成。

规格参数

其他规格

应用领域：细胞信号传导
自动化兼容性：是
品牌：HTRF
检测方式：HTRF
裂解缓冲液兼容性：裂解缓冲液 2、裂解缓冲液 3
产品类别：试剂盒
样品体积：16 µL
运输条件：干冰运输
靶标类别：磷蛋白
靶标物种：人
技术原理：时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）
治疗领域：肿瘤学与炎症
单位规格：500 个检测点

没有数据

货号：64ANDRPEY

一键复制

参考价格 ¥ 545226.97

产品规格

请咨询￥545226.97

参考货期：3-4周

选择数量

当前规格1件起购

加入购物车询价