当前位置：首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > Phosphoproteins > HTRF 4EBP1 P-T37/46 KIT - 50K PTS

HTRF 4EBP1 P-T37/46 KIT - 50K PTS

分享给好友

rvty_ls_sds_64BADPEY_US rvty_ls_sds_64BADPEY_UK rvty_ls_sds_64BADPEY_SPA rvty_ls_sds_64BADPEY_ITA rvty_ls_sds_64BADPEY_ELL rvty_ls_sds_64BADPEY_DEU rvty_ls_sds_64BADPEY_FRA

收藏咨询

品牌： Revvity

产品详情
相关解决方案
相关资源
相关视频
相关问答

概述

磷酸化 Bad（Ser112）细胞检测试剂盒旨在高效便捷地定量细胞裂解物中的磷酸化 BAD 蛋白。这种快速便捷、无需洗涤的检测方案具有高灵敏度，可应用于药物研发的各个环节，从基础研究到高通量筛选均可适用。

工作原理

磷酸化 BAD（Ser112）检测原理

磷酸化 BAD（Ser112）检测用于测量在 Ser112 位点发生磷酸化的 BAD 蛋白。与蛋白质印迹法不同，该检测完全基于微孔板进行，无需凝胶、电泳或转膜步骤。磷酸化 BAD（Ser112）检测采用两种标记抗体：一种带有供体荧光团，另一种带有受体荧光团。第一种抗体经筛选可特异性结合蛋白质上的磷酸化基序，第二种抗体则能不依赖蛋白质的磷酸化状态识别该蛋白质。蛋白质磷酸化会促使形成包含两种标记抗体的免疫复合物，使供体荧光团与受体荧光团靠近，从而产生 FRET 信号。信号强度与样品中磷酸化蛋白质的浓度直接相关，且在无需洗涤的检测格式中即可评估蛋白质的磷酸化状态。

磷酸化 BAD（Ser112）双板检测方案

双板方案包括：先在 96 孔板中培养细胞，裂解后将裂解物转移至 384 孔小体积检测板，再加入磷酸化 BAD（Ser112）HTRF 检测试剂。该方案能够监测细胞的活力和汇合度。

HTRF 总 BRD2 检测的双板方案

磷酸化 BAD（Ser112）单板检测方案

使用 HTRF 试剂检测磷酸化 BAD（Ser112）可在单个板中完成，该板可用于细胞培养、刺激和裂解，无需洗涤步骤。这种为高通量筛选（HTS）设计的方案能够实现微型化，同时保持稳定的 HTRF 质量。

HTRF 总 BRD2 检测的单板方案

检测验证

磷酸化 BAD（Ser112）试剂盒的蛋白质印迹法与 HTRF 检测对比

Cos-7 细胞在 T175 培养瓶中于 37°C、5% CO₂条件下培养 1 天。第 2 天：移除细胞培养基后，加入 3mL 补充的裂解缓冲液，孵育 30 分钟。离心 10 分钟后收集可溶性上清液。取等量裂解物进行蛋白质印迹法与 HTRF 检测的平行对比。使用 HTRF 磷酸化 Bad（Ser112）检测可检测到 220 个细胞，而蛋白质印迹法则需要 1750 个细胞。HTRF 检测的灵敏度是蛋白质印迹法的 4 倍。

磷酸化 BAD（Ser112）试剂盒对 HEK293 细胞的 PMA 剂量反应

人 HEK293 细胞（100,000 个细胞 / 孔）在 37°C 下用不同浓度的 PMA 刺激 30 分钟。裂解孵育 30 分钟后，采用双板检测方案测量磷酸化 Bad 蛋白的水平。

星形孢菌素对受刺激的 MCF7 和 Cos-7 细胞的抑制作用

人 MCF7 细胞和猴 Cos-7 细胞（25,000 个细胞 / 孔）与不同浓度的星形孢菌素抑制剂在 37°C 下孵育 3 小时。然后加入 0.8µM 的 PMA 刺激细胞，样品继续孵育 30 分钟。裂解孵育 30 分钟后，采用双板方案通过 HTRF 磷酸化 Bad（Ser112）检测测量 Bad 蛋白磷酸化的抑制情况。

简化通路

促凋亡因子 Bad 信号的简化通路

Bad 是属于 Bcl-2 蛋白家族的促凋亡因子，通过调节细胞色素 C 的释放来控制线粒体膜的通透性。在健康的增殖细胞中，Bad 处于磷酸化状态并被隔离在细胞质中；而在应激细胞中，死亡信号会诱导 Bad 去磷酸化，并使其转移到线粒体膜上，通过异源二聚化中和 Bcl-Xl 或 BCl-2，从而诱导细胞色素 C 释放，最终导致细胞凋亡。

规格参数

其他规格

应用领域：细胞信号传导
品牌：HTRF
检测方式：HTRF
分子修饰：磷酸化
产品类别：试剂盒
样品体积：16 µL
运输条件：干冰运输
靶标类别：磷酸化蛋白
靶标物种：人
技术：时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）
治疗领域：肿瘤学与炎症
单位规格：50,000 个检测点

没有数据

货号：64BP1PEY

一键复制

参考价格 ¥ 545226.97

产品规格

请咨询￥545226.97

参考货期：3-4周

选择数量

当前规格1件起购

加入购物车询价