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HTRF HISTONE H3 TOTAL KIT - 50K PTS

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概述

总组蛋白 H3 细胞检测试剂盒用作磷酸化组蛋白 H3 试剂盒的归一化检测工具。组蛋白 H3 是基因表达和有丝分裂的关键调节因子，是抗癌研究的有力工具。

工作原理
总组蛋白 H3 检测原理
总组蛋白 H3 检测可定量细胞裂解物中组蛋白 H3 的表达水平。与蛋白质印迹法不同，该检测完全基于微孔板进行，无需凝胶、电泳或转膜步骤。总组蛋白 H3 检测使用两种标记抗体：一种偶联供体荧光团，另一种偶联受体荧光团。两种抗体都对该蛋白上的特定表位具有高度特异性。当细胞提取物中存在组蛋白 H3 时，添加这些偶联物会使供体荧光团与受体荧光团近距离接触，从而产生 FRET 信号。其强度与样品中蛋白质的浓度直接成正比，并且在无需洗涤的检测形式下即可评估蛋白质的表达。

总组蛋白 H3 双板检测方案
双板方案包括：在 96 孔板中培养细胞，裂解后将裂解物转移至 384 孔小体积检测板，然后添加总组蛋白 H3 HTRF 检测试剂。该方案能够监测细胞活力和汇合度。

总组蛋白 H3 单板检测方案
使用 HTRF 试剂检测总组蛋白 H3 可在单个培养、刺激和裂解用板中进行，无需洗涤步骤。这种为高通量筛选（HTS）设计的方案可实现小型化，同时保持稳定的 HTRF 质量。

检测验证
总组蛋白 H3 作为磷酸化组蛋白 H3（Ser10）检测的归一化对照
将 NIH3T3 细胞（每孔 12.5KC）接种在 96 孔板中，并用诺考达唑（一种抗有丝分裂剂，可解聚微管并使细胞阻滞在有丝分裂期）处理，以刺激组蛋白 H3（Ser10）磷酸化。细胞（实验 a）或未（实验 b）与抑制剂 Danusertib 共同处理 16 小时。去除细胞培养基后，加入 200µL 补充裂解缓冲液，孵育 30 分钟。将各 10µL 裂解物转移至 384sv 白色板中，同时进行总组蛋白 H3 和 Ser10 磷酸化组蛋白 H3 的 HTRF 分析。

简化通路
总组蛋白 H3 细胞信号传导
组蛋白 3 是将 DNA 压缩成染色质的 5 种主要经典组蛋白之一。主要的球形组蛋白结构域位于长的 N 端组蛋白尾部，这些尾部经过高度翻译后修饰，负责形成高度浓缩的异染色质或浓缩程度较低的常染色质。不同类型的协同修饰（如乙酰化、甲基化和磷酸化）构成了组蛋白密码，由重塑机制解读。因此，组蛋白修饰在基因的动态和长期调控中起着重要作用，决定了周围 DNA 对转录机制的可及性高低。组蛋白 H3 尾部的 Ser10 或 Thr3 磷酸化参与基因表达和有丝分裂过程。

规格

其他规格
应用
细胞信号传导
品牌
HTRF
检测方式
HTRF
分子修饰
总（蛋白）
产品类别
试剂盒
样品体积
16µL
运输条件
干冰运输
靶标类别
磷蛋白
靶标物种
人
小鼠
技术
时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）
治疗领域
神经科学
单位规格
50,000 个检测点

没有数据

货号：64NH3PEY

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