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当前位置:首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > Second messengers > IP-ONE ELISA - 96 TESTS 磷酸肌醇ELISA测量试剂盒 - 96测试

概述

已知 G 蛋白偶联受体(GPCR)Gq 的激活会诱导磷脂酶 C(PLC)活化,并触发肌醇磷酸(IP)级联反应。


IP1 是 IP3 的下游代谢产物,在 Gq 受体激活后会在细胞内积累,且在氯化锂(LiCl)存在时保持稳定,使其成为理想的 GPCR(Gq)功能检测指标。


Revvity 公司开发了一种基于单克隆抗体的 IP-One ELISA 检测方法,可实现对 IP1 的简便且高精度测量。

工作原理

检测原理

IP-One ELISA 是一种竞争性免疫检测方法,使用 IP1 - 辣根过氧化物酶(IP1-HRP)和抗 IP1 单克隆抗体。该试剂盒配备预包被抗小鼠抗体的 96 孔微孔板。在 LiCl 存在的情况下刺激细胞,受体激活后会导致 IP1 积累。细胞刺激后的实验流程包括两个步骤:添加 ELISA 组分以及添加辣根过氧化物酶底物 TMB。终止辣根过氧化物酶反应后,在 450nm 处读取光密度(OD)。

检测详情

规格说明

IP1 是 IP3 的下游代谢产物,在 Gq 受体激活后在细胞内积累。


它在 LiCl 存在时保持稳定,非常适合用于 GPCR(Gq)功能检测。


  • 检测限:10 nM
  • 动态范围:10-3000 nM
  • 半最大效应浓度(EC50):110 nM
  • 特异性:与 50 µM 肌醇、PIP2、IP2、IP3、IP4 或 PIP3 无交叉反应


检测验证

检测性能

Cisbio IP-One ELISA 与细胞裂解物兼容,可用于活细胞功能检测。


在进行 IP-One ELISA 检测步骤之前,可使用多种板型对细胞进行刺激。


该图显示了在 24 孔板或 96 孔板中刺激的细胞上进行 IP-One ELISA 的结果。裂解细胞后,将其转移到试剂盒提供的 ELISA 板中。在 96 孔板中,每孔使用 80,000 个细胞;在 24 孔板中,每孔使用 400,000 个细胞。


两种细胞刺激格式产生的结果相似,且标准偏差较低。

规格参数

其他规格

  • 应用领域:第二信使检测
  • 检测方式:酶联免疫吸附测定(ELISA)
  • 动态范围:10-3000 nM
  • 检测限:10 nM
  • 产品类别:试剂盒
  • 样品体积:50 µL
  • 运输条件:常温运输
  • 靶标类别:G 蛋白偶联受体(GPCR)
  • 技术:酶联免疫吸附测定(ELISA)
  • 治疗领域:心血管疾病、传染病、代谢 / 糖尿病、非酒精性脂肪性肝炎 / 纤维化、神经科学、肿瘤与炎症、罕见病
  • 单位规格:96 个检测点


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