产品概述

活性胰高血糖素样肽 - 1（Active GLP-1）又称胰高血糖素样肽 - 1 活性形式（包括 GLP-1 (7-36) NH₂和 GLP-1 (7-37)），已成为 2 型糖尿病治疗中的关键生物标志物。GLP-1 的主要作用是促进胰岛素分泌、抑制胰高血糖素分泌和减少食物摄入。在体内，其活性形式会被二肽基肽酶 IV（DPP-IV）快速降解为无活性形式（9-36）NH₂和（9-37）。本活性 GLP-1 试剂盒专为快速检测细胞上清液中的 GLP-1 设计。

工作原理

检测原理

活性 GLP-1 的检测采用双抗夹心免疫分析技术，使用两种抗体：一种标记 Lumi4Tb - 穴状化合物（Lumi4Tb-Cryptate，供体），另一种标记 d2（受体）。信号强度与样本中活性 GLP-1 的浓度成正比。（标注：biomarkers-how-it-works-assay-principle-active 为图表 / 文件标识，可译为 “生物标志物 - 活性 GLP-1 检测原理”）

检测方案

活性 GLP-1 检测可直接用于细胞上清液，采用右侧所述的 “添加即读取” 简单流程（无洗涤步骤）。HTRF 偶联物可预先混合，通过单次加样步骤加入，进一步简化流程。仅需按比例调整各试剂的添加体积，检测即可在 96 孔至 384 孔板中进行。本方案以白色 384 孔小体积板为例进行说明。（标注：biomarkers-how-it-works-assay-protocol 为图表 / 文件标识，可译为 “生物标志物 - 活性 GLP-1 检测方案”）

检测详情

关键特征

• 孵育条件：室温过夜（ON at RT）
• 线性范围：43.8–1400 pg/mL
• 检测限：25 pg/mL*
• 物种反应性：大鼠、小鼠、人、猪
• 交叉反应：GLP-1 (7-36) 酰胺 100%、GLP-1 (7-37) 98.04%、GLP-1 (1-36) 酰胺 0.39%、GLP-1 (1-37) 0.37%、GLP-1 (9-36) 酰胺＜0.01%、GLP-1 (7-17)＜0.01%、GLP-2＜0.01%、胰高血糖素（Glucagon）＜0.01%
• 标准曲线：终检测体积 20 µL，使用 BMG LABTECH 公司 Pherastar 仪器读取
• * 注意：除 SpectraMax M5e 和 FlexStation 外，所有 HTRF 兼容读数仪均可达到该灵敏度标准

（标注：specifications-active 为图表 / 文件标识，可译为 “活性 GLP-1 检测规格”）

分析性能

HTRF 与 ELISA 检测格式对比

如下所示，活性 GLP-1 检测与传统 ELISA 检测相关性良好，同时具备操作简便、节省时间的优势。使用 NCI-H176 细胞粗上清液，在白色 384 孔小体积板中对两种方法进行平行对比，相关系数达 0.97（n=6）。

• HTRF 活性 GLP-1 检测：1 步混合读取（无洗涤），检测时间＜1 小时
• 荧光 ELISA 检测：6 个连续步骤，检测时间＞4 小时

（标注：analytical-performance-active-glp 为图表 / 文件标识，可译为 “活性 GLP-1 分析性能”）

检测验证

稀释线性评估

使用 HTRF 检测稀释液对 NCI-H716 细胞上清液 1 和上清液 2 进行系列稀释，分别测定粗上清液及 1:2、1:4、1:8、1:16 稀释样本中的 GLP-1 浓度。右侧图表显示 3 次独立实验的均值（± 标准差），实测浓度与预期浓度的强相关性表明，在检测范围内稀释具有良好线性。（标注：assay-validation-active-glp 为图表 / 文件标识，可译为 “活性 GLP-1 检测验证”）

NCI-H716 细胞中活性 GLP-1 分泌的葡萄糖剂量反应

测定人肠内分泌 NCI-H716 细胞经葡萄糖刺激后，活性 GLP-1 分泌的时间进程。将细胞（2×10⁵个 / 孔）接种到预包被基质胶（Matrigel）的 96 孔培养板中，用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基培养两天。实验当天，洗涤细胞后，用含梯度浓度葡萄糖的 KRB 缓冲液（添加 DPP-IV 抑制剂）孵育 2 小时。葡萄糖刺激结束后，取 10 µL 上清液转移至 384 孔小体积板，按 “检测方案” 测定活性 GLP-1 水平。结果符合预期，活性 GLP-1 的分泌呈葡萄糖剂量依赖性，10% 葡萄糖诱导的活性 GLP-1 最大分泌量是基础分泌量的 2.1 倍。（标注：assay-validation-active-glp 为图表 / 文件标识，可译为 “活性 GLP-1 检测验证”）

产品规格

其他规格

• 应用领域：Protein Quantification（蛋白定量）
• 品牌：HTRF
• 检测方式：HTRF（均相时间分辨荧光）
• 产品类别：Kit（试剂盒）
• 样本体积：10 µL
• 运输条件：干冰运输（Shipped in Dry Ice）
• 靶标类别：Biomarkers（生物标志物）
• 技术平台：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）
• 治疗领域：Metabolism/Diabetes（代谢 / 糖尿病）
• 单位规格：100,000 次检测（100,000 assay points）