产品概述

CCL22（C-C 基序趋化因子 22）又称巨噬细胞衍生趋化因子（MDC），是由树突状细胞（DC）、巨噬细胞和活化 B 淋巴细胞分泌的趋化因子。CCL22 可与多种细胞表面的 CCR4 受体结合。CCL22 由 M2 型巨噬细胞分泌，参与辅助性 T 细胞 2（Th2）相关反应，如吞噬作用、组织修复和伤口愈合。研究表明，CCL22 通过结合 CCR4，还与特应性疾病的发病机制相关，例如哮喘和特应性皮炎（AD）。血清样本检测通常需要更高的灵敏度，AlphaLISA 检测技术的灵敏度足以检测血清或血浆中低水平的分析物。检测时需严格遵循推荐方案，避免使用严重溶血的样本。

工作原理

检测原理

将细胞上清液、样本或标准品直接加入检测板（384 孔低体积白色板或 Revvity 低体积 96 孔板，终体积 20 µL），随后使用 HTRF 试剂进行检测。标记 HTRF 供体和受体的抗体已预先混合，可通过单次加样步骤加入，进一步简化检测流程。仅需按比例调整各试剂的添加体积，检测即可适配至 1536 孔板格式。（标注：how-it-works_assay-protocol 为图表 / 文件标识，可译为 “CCL22 检测方案”）

检测数据分析

酶联免疫吸附试验（ELISA）标准曲线拟合通常推荐使用 4 参数逻辑（4PL）曲线。与线性分析相比，该回归模型能在更宽的浓度范围内准确量化未知样本，非常适合细胞因子释放等生物系统的分析。如需详细了解 HTRF 数据处理及 4PL 1/y² 拟合方法，可访问相关页面。Cisbio 已与Myassays.com合作，为数据分析提供支持，点击链接即可获取免费在线软件进行 CCL22 检测分析。

检测详情

人源 CCL22 试剂盒技术规格

• 样本量：16 µL
• 最终检测体积：20 µL
• 试剂盒组分：冻干标准品、冷冻检测抗体、缓冲液及实验方案
• 检测限（LOD）与定量限（LOQ）：稀释液中分别为 5.7 pg/mL 与 7.9 pg/mL；RPMI 培养基中分别为 9.8 pg/mL 与 16.8 pg/mL；DMEM 培养基中分别为 7.7 pg/mL 与 13.8 pg/mL
• 检测范围：35–4000 pg/mL
• 出结果时间：室温 4 小时至过夜
• 适用物种：仅人（Human only）

分析性能

批内与批间精密度

批内精密度（n=24）

• 每个样本检测 24 次，计算各样本变异系数（% CV）
• 样本 1：CCL22 均值 584 pg/mL，变异系数（CV）9%
• 样本 2：CCL22 均值 284 pg/mL，变异系数（CV）4%
• 样本 3：CCL22 均值 139 pg/mL，变异系数（CV）7%
• 平均 CV：6%

批间精密度（n=4）

• 每个样本在 4 个独立实验中检测，计算各样本变异系数（% CV）
• 样本 1：CCL22 均值 560 pg/mL，变异系数（CV）7%
• 样本 2：CCL22 均值 396 pg/mL，变异系数（CV）9%
• 平均 CV：9%

稀释线性

• 样本 1：原液检测值 584 pg/mL；1:2 稀释预期 292 pg/mL，实测 284 pg/mL，回收率 97%；1:4 稀释预期 142 pg/mL，实测 139 pg/mL，回收率 98%；平均回收率 97%
• 样本 2：原液检测值 1168 pg/mL；1:2 稀释预期 584 pg/mL，实测 584 pg/mL，回收率 100%；1:4 稀释预期 292 pg/mL，实测 262 pg/mL，回收率 90%；平均回收率 95%
• 实验结果显示，该检测具有良好的稀释线性

加标回收

• 实验设计：向两种经刺激的 PBMC 上清液（S1、S2）中添加不同量的重组细胞因子（P1、P2、P3），通过标准曲线结果与预期值对比计算回收率
• S1 样本：空白组检测值 596 pg/mL；添加 P1（845 pg/mL）回收率 95%、P2（401 pg/mL）回收率 96%、P3（167 pg/mL）回收率 93%；平均回收率 95%
• S2 样本：空白组检测值 350 pg/mL；添加 P1（845 pg/mL）回收率 109%、P2（401 pg/mL）回收率 102%；平均回收率 105%
• 回收率接近 100%，验证了该检测的样本基质适用性

检测验证

PHA-P 和 PHA-M 刺激 PBMC 细胞分泌 CCL22

将 PBMC 细胞以 2×10⁵个 / 孔和 3×10⁵个 / 孔的密度接种，分别用 10 µg/mL 的 PHA-P 和 PHA-M 刺激 72 小时。取 16 µL 上清液转移至 384 孔低体积白色检测板中，加入 4 µL HTRF 人源 CCL22 检测试剂，室温过夜孵育后读取信号。通过 RPMI 培养基配制的标准曲线估算样本中 CCL22 浓度，结果显示 PHA-M 刺激后的 CCL22 分泌量高于 PHA-P，未刺激样本中仅检测到少量 CCL22。（标注：assay-validation_human 为图表 / 文件标识，可译为 “人源 CCL22 检测验证”）

不同技术的校准对比

将不同密度的 PBMC 细胞用 10 µg/mL PHA-P 刺激 48 小时或 72 小时，分别通过 HTRF 人源 CCL22 检测试剂盒、AlphaLISA 人源 CCL22 检测试剂盒和 ELISA 试剂盒，对纯样本和稀释样本的 CCL22 浓度进行估算。

• HTRF 检测：16 µL 上清液加入 384 孔低体积白色检测板，添加 4 µL 检测试剂，室温过夜孵育后读取信号
• AlphaLISA 检测：5 µL 上清液加入 384 孔灰色检测板，添加 45 µL 检测试剂，室温孵育 3 小时后读取计数
• 结果显示：HTRF 与 AlphaLISA 检测的浓度估算结果一致，而 ELISA 检测的估算值仅为前两者的一半

（标注：assay-validation_human 为图表 / 文件标识，可译为 “人源 CCL22 检测验证”）

产品规格

其他规格

• 应用领域：Protein Quantification（蛋白定量）
• 品牌：HTRF
• 检测方式：HTRF（均相时间分辨荧光）
• 产品类别：Kit（试剂盒）
• 样本体积：16 µL
• 运输条件：干冰运输（Shipped in Dry Ice）
• 靶标类别：Cytokines（细胞因子）
• 靶标物种：人（Human）
• 技术平台：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）
• 单位规格：500 次检测（500 assay points）