产品概述

颗粒体蛋白前体（Progranulin，又称上皮蛋白前体或前列腺癌细胞衍生生长因子）是颗粒体蛋白（granulin）的前体蛋白。该蛋白与额颞叶变性（FTLD）及阿尔茨海默病相关，可能具有抵御 β 淀粉样蛋白毒性的保护作用。这款基于细胞的 HTRF 检测试剂盒可快速获得结果，适用于利用颗粒体蛋白前体分泌细胞进行化合物功能筛选。

工作原理

检测原理

人颗粒体蛋白前体的检测采用夹心免疫分析技术，涉及两种特异性抗人颗粒体蛋白前体抗体：一种标记铽穴状化合物（Terbium Cryptate，供体），另一种标记 d2（受体）。检测信号强度与样本中颗粒体蛋白前体的浓度呈正比。（标注：human-progranulin-kit-1.svg 为图表标识，对应 “人颗粒体蛋白前体试剂盒检测原理”）

检测流程

颗粒体蛋白前体检测流程简便，采用 384 孔小体积白色检测板（最终体积 20 µL），具体操作如下：将细胞上清液、样本或标准品直接加入检测板，用于检测人颗粒体蛋白前体。标记 HTRF 供体和受体的抗体可预先混合，通过单次加样步骤加入，进一步简化检测流程。只需按比例调整各试剂的添加体积，该检测即可适配 96 孔至 384 孔板格式。（标注：human-progranulin-kit-2.svg 为图表标识，对应 “人颗粒体蛋白前体试剂盒检测流程”）

检测详情

批内与批间精密度

批内精密度（n=24）

对 5 个样本分别进行 24 次检测，计算浓度变异系数（% CV）：样本 1（颗粒体蛋白前体均值 781 pg/mL）CV 为 2.1%，样本 2（均值 3125 pg/mL）CV 为 2.1%，样本 3（均值 6250 pg/mL）CV 为 1.4%，样本 4（均值 25000 pg/mL）CV 为 1.2%，样本 5（均值 50000 pg/mL）CV 为 1.2%；平均 CV 仅 1.6%，体现极高的检测重复性。

批间精密度（n=4）

对 5 个样本在 4 个不同实验中分别检测，计算浓度变异系数（% CV）：样本 1（颗粒体蛋白前体均值 777 pg/mL）CV 为 11%，样本 2（均值 1787 pg/mL）CV 为 12%，样本 3（均值 4109 pg/mL）CV 为 13%，样本 4（均值 21739 pg/mL）CV 为 10%，样本 5（均值 50000 pg/mL）CV 为 8%；平均 CV 为 11%，保障不同实验批次间的结果稳定性。

稀释线性

对样本进行 1–64 倍梯度稀释，检测结果显示：稀释 2 倍时回收率 99%，4 倍时 99%，8 倍时 94%，16 倍时 102%，32 倍时 105%，64 倍时 106%，平均回收率达 101%。实验获得的优异回收率表明该检测具有良好的线性关系。

加标回收

向 3 种不同血清样本中加入相同量的重组蛋白，将标准曲线获得的响应值与计算的预期值进行对比：样本 1 的回收率为 92%–97%，样本 2 为 95%–104%，样本 3 为 99%–105%，整体回收率接近 100%，验证了该检测所用样本基质的适用性。

检测验证

诱导多能干细胞（iPSC）来源小胶质细胞的颗粒体蛋白前体分泌

诱导多能干细胞来源小胶质细胞（iPSC-Microglia）的制备参照 McQuade 等人 2018 年的研究方法。在不含转化生长因子 -β1（TGF-β1）的条件下，用 10 ng/mL 细胞因子刺激 iPSC 来源小胶质细胞 24 小时，收集细胞上清液，按试剂盒说明书流程检测颗粒体蛋白前体的分泌水平。结果与文献一致：干扰素 -γ（IFN-γ）+ 白细胞介素 - 1β（IL-1β）（促炎因子）处理的小胶质细胞，颗粒体蛋白前体释放呈下降趋势；而抗炎性 Th2 细胞因子（IL-4 和 IL-13）处理后，颗粒体蛋白前体分泌显著增加。（数据由加州大学欧文分校的 Amanda McQuade 和 Mathew Blurton-Jones 博士提供）（标注：human-progranulin-kit 为图表标识，对应 “人颗粒体蛋白前体试剂盒检测验证”）

产品规格

• 应用领域：蛋白定量（Protein Quantification）
• 品牌：HTRF
• 检测方式：HTRF（均相时间分辨荧光）
• 产品类别：试剂盒（Kit）
• 样本体积：16 µL
• 运输条件：干冰运输（Shipped in Dry Ice）
• 靶标类别：生物标志物（Biomarkers）
• 靶标物种：人（Human）
• 技术平台：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）
• 单位规格：100,000 次检测（100,000 assay points