产品概述

I 型干扰素（包括干扰素 α（IFN-α）和干扰素 β（IFN-β））在病毒感染后的先天免疫反应中发挥关键作用。IFN-β 由成纤维细胞、巨噬细胞、树突状细胞及内皮细胞产生，其基因表达受模式识别受体（如 Toll 样受体）下游的干扰素调节因子 3（IRF-3）、c-Jun/ATF-2 和核因子 κB（NF-κB）等转录因子调控。IFN-β 是环鸟苷酸 - 腺苷酸合成酶（cGas）- 环鸟苷酸 - 腺苷酸（cGAMP）- 干扰素基因刺激蛋白（STING）通路激活的主要功能性读数指标。分泌后，IFN-β 结合并激活 IFNAR1/IFNAR2 受体复合物，该过程依赖 STAT1/2 转录因子，磷酸化的 STAT1/2 会诱导抗病毒基因表达。血清样本检测通常需要更高的灵敏度，AlphaLISA 检测技术的灵敏度足以检测血清或血浆中低水平的分析物。

工作原理

检测原理

将细胞上清液、样本或标准品直接加入检测板（384 孔低体积白色板或 Revvity 低体积 96 孔板，终体积 20 µL），随后使用 HTRF 试剂进行检测。标记 HTRF 供体和受体的抗体已预先混合，可通过单次加样步骤加入，进一步简化检测流程。仅需按比例调整各试剂的添加体积，检测即可适配至 1536 孔板格式。（标注：ifn beta 为图表 / 文件标识，可译为 “人源 IFN-β 检测原理”）

检测数据分析

酶联免疫吸附试验（ELISA）标准曲线拟合通常推荐使用 4 参数逻辑（4PL）曲线。与线性分析相比，该回归模型能在更宽的浓度范围内准确量化未知样本，非常适合细胞因子释放等生物系统的分析。

检测详情

人源 IFN-β 试剂盒技术规格

• 样本量：14 µL（产品规格标注 16 µL 为笔误，以检测详情为准）
• 最终检测体积：20 µL
• 试剂盒组分：冻干标准品、冷冻检测抗体、激活试剂、缓冲液及实验方案
• 检测限（LOD）与定量限（LOQ）（稀释液中）：7 pg/mL 与 19 pg/mL
• 检测范围：19–4000 pg/mL
• 出结果时间：室温 3 小时（3 h at RT）
• 校准公式：NIBSC（00/572）值（IU/mL）= 0.44 × HTRF 人源 IFN-β 值（pg/mL）
• 适用物种：仅人（Human only）

分析性能

批内与批间精密度

批内精密度（n=24）

• 每个样本检测 24 次，计算各样本变异系数（% CV）
• 样本 1：IFN-β 均值 33 pg/mL，变异系数（CV）4%
• 样本 2：IFN-β 均值 321 pg/mL，变异系数（CV）3%
• 样本 3：IFN-β 均值 3900 pg/mL，变异系数（CV）5%
• 平均 CV：4%

批间精密度（n=4）

• 每个样本在 4 个独立实验中检测，计算各样本变异系数（% CV）
• 样本 1：IFN-β 含量 62 pg/mL，delta 比值均值 374，变异系数（CV）10%
• 样本 2：IFN-β 含量 329 pg/mL，delta 比值均值 1628，变异系数（CV）7%
• 样本 3：IFN-β 含量 1739 pg/mL，delta 比值均值 5690，变异系数（CV）9%
• 平均 CV：9%

检测验证

cGAMP 激活 STING 通路诱导 PBMC 释放人源 IFN-β

将 4×10⁵个 PBMC 接种到 96 孔板中，加入 100 µL 细胞培养基，随后用 50 µL 67 µM 的 cGAMP 刺激。室温过夜孵育后，取 14 µL 上清液转移至白色检测板，通过 HTRF 技术定量人源 IFN-β。（标注：assay validation - human ifn beta 1 为图表 / 文件标识，可译为 “人源 IFN-β 检测验证 1”）

LPS 有效诱导 THP1 细胞释放人源 IFN-β

将 4×10⁵个 THP1 细胞接种到 96 孔板中，加入 100 µL 培养基，用 50 µL 20 µg/mL 的 LPS 刺激。孵育 4.5 小时后，取 14 µL 上清液转移至白色检测板，通过 HTRF 技术定量人源 IFN-β。（标注：human ifn beta 2 为图表 / 文件标识，可译为 “人源 IFN-β 检测验证 2”）

表达组成型激活 STING 变体的重组 THP1 细胞自发释放人源 IFN-β

将 4×10⁵个 THP1-WT 细胞（野生型）和 THP1-S154 细胞（THP1-Dual™ KI-hSTING-S154 细胞，Invivogen）接种到 96 孔板中，加入 100 µL 细胞培养基。孵育 4.5 小时后，取 14 µL 上清液转移至白色检测板，通过 HTRF 技术定量人源 IFN-β。（标注：assay validation - human ifn beta 3 为图表 / 文件标识，可译为 “人源 IFN-β 检测验证 3”）

dsDNA 模拟物（CDS 激动剂）诱导人源 IFN-β 分泌

将 4×10⁵个 THP1-S154 细胞（THP1-Dual™ KI-hSTING-S154 细胞，Invivogen）接种到 96 孔板中，加入 100 µL 细胞培养基，随后用 dsDNA 模拟物（CDS 激动剂–LyoVec，Invivogen）处理。室温过夜孵育后，取 14 µL 上清液转移至白色检测板，通过 HTRF 技术定量人源 IFN-β。（标注：assay validation - human ifn beta 4 为图表 / 文件标识，可译为 “人源 IFN-β 检测验证 4”）

产品规格

其他规格

• 应用领域：Protein Quantification（蛋白定量）
• 品牌：HTRF
• 检测方式：HTRF（均相时间分辨荧光）
• 产品类别：Kit（试剂盒）
• 样本体积：14 µL（以检测详情技术规格为准）
• 运输条件：干冰运输（Shipped in Dry Ice）
• 靶标类别：Cytokines（细胞因子）
• 靶标物种：人（Human）
• 技术平台：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）
• 治疗领域：Oncology & Inflammation（肿瘤学与炎症）
• 单位规格：100,000 次检测（100,000 assay points）