STAT3作为JAK-STAT信号通路的核心转录因子,其磷酸化水平是评价该通路活化的关键指标,在免疫、肿瘤及药物研发中备受关注。瑞孚迪(Revvity)基于成熟的HTRF®与AlphaLISA®均相检测平台,正式推出STAT3检测高性能(HP)升级方案,并新增STAT3 Ser727磷酸化检测,为研究人员提供灵敏度更高、信号更强、适用模型更广的解决方案。
HTRF平台
STAT3 p-Tyr705检测性能显著提升
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01灵敏度优化
可在约1500个HeLa细胞中稳定检测STAT3 p-Tyr705,信噪比达2.7(图1)。
图1. 经IFNα2b刺激后不同HeLa细胞密度的STAT3 p-Y705检测结果
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02信噪比增强
在JAK抑制剂梯度实验中,信噪比提升至10.1,更好呈现剂量依赖性抑制(图2)。
图2. JAK抑制剂处理的HeLa细胞中STAT3 p-Y705的检测结果
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03模型适用性扩展
即使在低磷酸化背景的PBMC模型中,也能清晰捕捉IL-6诱导的STAT3 p-Tyr705剂量依赖性升高。
图3. 经IL-6刺激的PBMC细胞中STAT3 p-Y705和Total检测结果
AlphaLISA平台
STAT3 Total与p-Tyr705检测同步升级
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01信噪比大幅提高
在THP-1细胞中,较老版本试剂盒,p-Tyr705 HP试剂盒信噪比提升近3倍,Total HP信号提升约20倍(图4)。
图4. STAT3 Total和STAT3 p-Y705新/老试剂盒的比较
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02动态范围更宽
可检测低至约50个A431细胞裂解液中的STAT3 Total和p-Tyr705信号(图5)。
图5. 不同A431细胞密度的STAT3 Total和STAT3 p-Y705检测结果
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03细胞兼容性广
覆盖各类贴壁与悬浮细胞,适应不同表达水平(图6)。
图6. 不同细胞系STAT3检测结果
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04更全面的验证数据
不同细胞的磷酸化刺激或抑制实验均有良好的信噪比(图7)。更多验证数据详见瑞孚迪官网(www.revvity.cn)。
图7. IFNα刺激(左)和Ruxolitinib抑制(右)后THP-1细胞中STAT3 Total和STAT3 p-Y705的检测结果
AlphaLISA平台新增STAT3 Ser727磷酸化位点
全面覆盖STAT3关键磷酸化位点,助力多维度信号机制研究。该试剂盒具备宽动态范围与高信噪比,适用于多种细胞模型(图8),更多的验证数据详见瑞孚迪官网(
www.revvity.cn)。
图8. AlphaLISA STAT3 p-Ser727试剂盒的检测范围(左)和A431细胞模型检测结果(右)
总结Summary
HP版本在灵敏度、信噪比和稳健性方面全面提升,支持在更低细胞量、更复杂生理模型(如原代细胞)中实现可靠检测,推动基础研究向转化应用迈进。
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