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当前位置:首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > HTRF IL23/IL12RB1 BIND. KIT - 500 PTS 白细胞介素23/白细胞介素12受体β1结合检测试剂盒

概述


白细胞介素 23(IL23)参与机体抗感染免疫应答,可上调基质金属蛋白酶 9(MMP9)的表达、促进血管生成,并减少 CD8 阳性 T 细胞向肿瘤组织的浸润。在肿瘤学与肿瘤免疫研究领域,IL23 因其对 T 细胞浸润的影响以及对 Th17 细胞分化的促进作用而被广泛研究。抗 IL23 抗体也已被开发用于治疗克罗恩病和银屑病。

IL23 是由 p19 和 p40 两个亚基组成的异二聚体细胞因子,可与由 IL23R 和 IL12Rβ1 构成的异二聚体受体结合。人源 IL23/IL12Rβ1 检测试剂盒对 IL23/IL12Rβ1 具有高度特异性,特别适用于抗 p40 亚基抗体的发现与质量验证。


工作原理


检测原理

HTRF IL23/IL12Rβ1 结合试剂盒用于检测 IL23 与 IL12Rβ1 蛋白之间的相互作用。在无干预条件下,IL23 与 IL12Rβ1 结合,两种检测抗体分别结合各自带标签的蛋白,从而产生 HTRF 信号。当加入待测化合物或人源阻断性抗体时,IL23 与 IL12Rβ1 的相互作用被破坏,HTRF 信号随之降低。

assay-principle-il23-il12rb-binding-kit-1.svg


检测流程

人源 IL23/IL12Rβ1 结合实验可在 96 孔或 384 孔低体积白色微孔板中进行(终体系 20 微升)。操作如下:将样品或标准品直接加入检测板,随后加入带标签 1 的 IL23 蛋白与带标签 2 的 IL12Rβ1 蛋白,再加入 HTRF 检测试剂,即铕穴状化合物标记的抗标签 1 抗体与 XL665 标记的抗标签 2 试剂。带有 HTRF 荧光基团的试剂可预先混合后一次性加样。实验无需洗涤步骤。通过按比例调整各试剂加样体积,可进一步实现实验体系的微型化或扩大化。

assay-protocol-il23-il12rb-binding-kit-2.svg


实验验证


IL23/IL12Rβ1 阻断剂的抑制作用

实验检测了三种靶向 IL12/IL23 的 p40 亚基抗体的抑制效果,同时设置了抗 IL6 抗体托珠单抗与抗 TNFα 抗体阿达木单抗作为对照。优特克单抗、MT3279H 和 MT86/221 均可抑制 IL23 与 IL12Rβ1 的相互作用,其半数抑制浓度 IC50 分别为 8.0、1.5 和 4.6 纳摩尔。如预期一致,托珠单抗和阿达木单抗未表现出抑制作用。

assay-principle-il23-il12rb-binding-kit-3.svg


IL23/IL12Rβ1 标准品的抑制作用

在试剂盒推荐条件下,标准品的剂量反应曲线显示其 IC50 为 1.4±0.3 纳摩尔。

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规格


其他参数

应用:蛋白 - 蛋白相互作用

品牌:HTRF

检测方式:HTRF

产品类别:试剂盒

样本体积:2 微升

运输条件:干冰运输

靶点类型:结合检测

靶点物种:人

技术:TR-FRET

治疗领域:炎症

规格:500 次检测


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