HTRF HYBRIDOMA BIND.(GST) KIT - 500 PTS

产品概述

杂交瘤技术仍是目前制备治疗性抗体最常用的核心技术，但从免疫动物体内制备并筛选杂交瘤细胞的过程耗时较长，且仅能筛选出适应性免疫反应中产生的部分抗体。因此，对杂交瘤细胞上清液与目标抗原的高效结合能力进行筛选，已成为杂交瘤技术应用中的关键环节。本HTRF杂交瘤结合试剂盒，专为检测杂交瘤细胞上清液中抗体与目标抗原的结合活性设计，可实现精准、高效的抗体筛选。

工作原理

检测原理

该试剂盒采用夹心免疫检测法，定量检测杂交瘤细胞上清液中的抗体与GST标签抗原的结合能力，核心反应体系包含两种标记抗体：1. 标记了HTRF供体的抗GST抗体：负责特异性结合GST标签抗原；2. 标记了受体染料的抗小鼠抗体：负责结合杂交瘤细胞分泌的鼠源抗体。当杂交瘤细胞上清液中的抗体与GST标签抗原成功结合时，会形成“抗GST供体抗体-GST抗原-杂交瘤抗体-抗小鼠受体抗体”的复合物，此时供体与受体的距离达到能量转移范围，进而产生可检测的HTRF信号，信号强度与抗体和抗原的结合量呈正相关。（标注：hybridoma-binding-kit，对应“杂交瘤结合试剂盒检测原理示意图”）

检测流程

本试剂盒可在96孔或384孔低体积白色微孔板中进行检测，最终反应体积为20 µL，具体操作步骤如下：1. 直接将杂交瘤细胞上清液样本加入检测板中；2. 加入GST标签抗原，孵育后再加入HTRF检测试剂（标记铕穴状化合物的抗GST抗体 + 标记d2的抗小鼠抗体）；3. 完成孵育后，读取HTRF信号即可。注：实验体系可根据需求灵活放大或缩小，只需按比例调整各组分的添加体积。（标注：hybridoma-binding-kit，对应“杂交瘤结合试剂盒检测流程示意图”）

检测验证

以GST标签β-连环蛋白（GST tagged beta catenin）为目标抗原，验证本试剂盒的检测性能，具体验证条件与结果如下：1. 实验条件：使用浓度为5 nM的GST标签β-连环蛋白抗原，室温孵育1小时，采用抗GST铕穴状化合物抗体与抗小鼠d2抗体作为检测试剂；2. 实验结果：阳性样本（红色）与阴性样本（橙色）的HTRF信号差异显著，同时通过杂交瘤（GST抗原）对照验证了实验体系的有效性。（标注：hybridoma-binding-kit，对应“GST标签β-连环蛋白结合检测结果图”）

产品规格

- 应用领域：蛋白-蛋白相互作用检测、杂交瘤抗体筛选- 品牌：HTRF- 检测方式：HTRF- 产品类别：试剂盒- 样本体积：5 µL- 运输条件：干冰运输- 靶标类别：结合检测- 技术平台：时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）- 适用治疗领域：炎症、神经科学、肿瘤与炎症- 单位规格：500次检测